Toll受體在IBD致病機制中的作用.pdf

1、本研究分為二部分：第一部分：實驗性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜TLR2、TLR4、TLR9的表達
　　 目的：觀察TLR2、TLR4、TLR9在實驗性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中的表達,探討TLR2、TLR4、TLR9在IBD發(fā)病機制中的作用。
　　 方法：三硝基苯磺酸（TNBS）+乙醇灌腸制備實驗性結(jié)腸炎大鼠模型，肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化；免疫組化S-P法觀察TLR2、TLR4、TLR9的表達，RT-PCR檢測其mRNA

2、相對含量；紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測組織中MPO、SOD含量的變化。
　　 結(jié)果：造模后結(jié)腸固有層及黏膜下層可見大量中性粒細胞、部分淋巴細胞和少許嗜酸性粒細胞浸潤，并可見隱窩膿腫、肉牙組織及黏膜肌層增厚；與正常組相比，模型組腸黏膜MPO含量顯著上升（P<0.01），SOD含量明顯下降（P<0.01）；正常組TLR2、TLR4在黏膜下層及固有層炎性細胞胞膜和胞漿上有少量表達，TLR9未見表達，造模后腸組織TLR2、TL

3、R4、TLR9表達明顯增加（P 均<0.01），且見TLR2表達于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜，TLR4表達于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜及腺上皮近腺腔側(cè)胞膜；RT-PCR檢測三者mRNA相對含量增高，而正常對照組三者均未能檢出；TLR2、TLR4、TLR9表達與MPO呈正相關(guān)，與SOD呈負相關(guān)(P 均<0.05)。
　　 結(jié)論：TNBS+乙醇模型實驗性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達增強，可能與腸道的自我免疫損傷有關(guān)。
　　 第

4、二部分：不同微生態(tài)制劑應(yīng)用于實驗性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達變化
　　 目的：觀察美常安、麗珠腸樂應(yīng)用于實驗性結(jié)腸炎大鼠后TLR2、TLR4、TLR9表達的變化，探討其作用機制，并與柳氮磺胺吡啶（SASP）比較。
　　 方法：三硝基苯磺酸（TNBS）+乙醇灌腸制備實驗性結(jié)腸炎大鼠模型后，美常安、麗珠腸樂及SASP每日灌胃一次，10天后處死，肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化；免疫組化S-P法觀察TL

5、R2、TLR4、TLR9的表達，RT-PCR檢測其mRNA相對含量；紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測組織中MPO、SOD含量的變化。
　　 結(jié)果：美常安及SASP治療后肉眼及組織學(xué)變化好轉(zhuǎn)，與模型組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 均<0.01），TLR2、TLR4、TLR9陽性率下降，其mRNA含量降低，與模型組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 均<0.05），腸黏膜MPO含量下降，SOD含量上升，與模型對照組相比差異均具有統(tǒng)計學(xué)意

6、義（P 均<0.01）。美常安及SASP兩組之間上述指標均無統(tǒng)計學(xué)意義。麗珠腸樂治療后上述改變與模型組相比均不具有統(tǒng)計學(xué)意義。TLR2、TLR4、TLR9表達與MPO呈正相關(guān)，與SOD呈負相關(guān)，(MPO: r=0.515,0.386，0.537；P 均<0.01；SOD: r=-0.523，-0.474，-0.566；P 均<0.01)。
　　 結(jié)論：美常安及SASP應(yīng)用于實驗性結(jié)腸炎模型大鼠有效，可能于下調(diào)TLR2、TLR4、