MUC2在IBD動物模型的作用機制研究.pdf

1、研究背景：
　　炎癥性腸病(IBD),發(fā)病率逐年上升，已是全球重要消化系統(tǒng)疾病問題,主要分為潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）與克羅恩病（Crohn’s disease， CD）,確切病理機制不明，可能與腸道內(nèi)菌群與免疫介導(dǎo)的粘膜屏障組織損傷等多方面因素綜合作用有關(guān)，任何單一因素破壞均可能誘發(fā)IBD，粘蛋白MUC2是組成腸道粘膜屏障的一部分,目前國內(nèi)對此研究的較少。
　　目的：
　　通過觀察慢性

2、 IBD動物模型中結(jié)腸組織學(xué)變化，檢測小鼠血清及解除組織中CBir1、muc2表達水平，給與模型組不同的干預(yù)措施，探討muc2在IBD中作用機制，以便探討IBD相關(guān)發(fā)病機理。
　　方法：
　　雄性的BALb/c小鼠SPF級60只，完全隨機分4組，15只/組。①對照組：不進行干預(yù)，自由飲用水跟食物。②TNBS/50％乙醇組：在第1天用TNBS/50%乙醇2.0mg/100μl灌腸，第8天用TNBS/50%乙醇2.5mg/100

3、μl灌腸，第15天用TNBS/50%乙醇3.0mg/100μl灌腸。③酮替芬（ketotifen）+TNBS+50%乙醇組：TNBS/50%乙醇同②，應(yīng)用0.5mg酮替芬(溶于100μl生理鹽水，并每次灌腸前30min小鼠的腹腔內(nèi)注射100μl上述酮替芬溶液。④LPS+TNBS+OVA+50%乙醇組:LPS（10μg）與OVA（20μg）加入100μl0.9%氯化鈉溶液中，分別于4個不同時間點（7，9，12，15）腹腔注射100μl，將

4、 OVA（50μg）加入100ul0.9%氯化鈉溶液中，并分別在灌腸前腹腔注射（18,19,20,21）。然后對各組每只小鼠分別進行DAI評分，在第9天各組各處死1只行結(jié)腸組織PAS染色，在第22天處死所有小鼠，測定各組小鼠血清的 muc2、抗-CBir1濃度，并運用 HE染色所取小鼠的組織，碘酸雪夫染色（Periodic Acid-Schiff stain，PAS）進行染色后及免疫組化方法檢測小鼠IBD動物模型觀察MUC2的表達。

5、r>　　運用SPSS17.0統(tǒng)計軟件將實驗數(shù)據(jù)進行處理，計量數(shù)據(jù)正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，符合正態(tài)分布者用均數(shù)±標準差（±S）進行統(tǒng)計描述，應(yīng)用t檢驗或矯正的t檢驗進行統(tǒng)計分析；不符合正態(tài)分布者用中位數(shù)及（25分位數(shù)-75分位數(shù)）[M(P25- P75)]進行統(tǒng)計描述，用秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。定性資料的分析應(yīng)用卡方檢驗。設(shè)定α=0.05，P<0.05認為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　（1）正常對照組：結(jié)腸粘膜上皮細胞排列整

6、齊，未見炎性細胞侵潤，②TNBS+50%酒精組、③TNBS+TTF組、④LPS+OVA+TNBS+50%組對比正常對照組，漿細胞增多，可見淋巴細胞，淋巴濾泡增多，而LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組正常腺體結(jié)構(gòu)基本消失，炎癥程度最高，可見大量炎性細胞浸潤，甚至可累及全層。
　?。?）HI評分、DAI評分②TNBS+50%乙醇組、③TTF+TNBS+50%乙醇組、④LPS+OVA+TNBS+50%乙醇組高于正常對照組(P＜0.0

7、5)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；②TNBS組、③酮替芬組、④LPS組的碘酸雪夫染色及IHCE方法測定MUC2表達低于正常對照組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，碘酸雪夫染色及IHCE所測定 MUC2表達②TNBS組低于③酮替芬組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；③酮替芬組PAS染色及免疫組化測定的MUC2表達T低于④LPS組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；
　　結(jié)論：
　?。?）BALb/c小鼠TNBS+50%乙醇灌腸，成功