番瀉苷A、B對照品的制備及番瀉豆莢中番瀉苷A、B的含量測定.pdf

1、目的：采用高效液相色譜法測定幾批番瀉葉中番瀉苷A、B的含量，以含量最高的一批番瀉葉為原料，提取對照品番瀉苷A、B，并以番瀉豆莢為研究對象，建立番瀉豆莢中番瀉苷A、B含量測定的方法。以證實(shí)番瀉豆莢中含有與番瀉葉相同的瀉下有效成分番瀉苷A、B，并與葉中二者的含量做比較。
　　方法：首先通過對測定條件的優(yōu)化，采用高效液相色譜法測定番瀉葉中番瀉苷A、B的含量，以二者含量之和為指標(biāo)，選出含量最高的一批番瀉葉做原料，考察影響提取的各種因素，確

2、定番瀉葉中二蒽酮化合物的提取工藝。此工藝為：番瀉葉粗粉加入含0.1％碳酸氫鈉的30%甲醇溶液采用超聲提取方法提取，得提取溶液。提取液濃縮，調(diào)pH值5.0，上D101大孔吸附樹脂柱，先以水洗，再以30%乙醇洗脫，收集洗脫液，低溫濃縮至干，得提取物。進(jìn)一步將提取液酸化，以正丁醇萃取，得總二蒽酮化合物，經(jīng)過制備高效液相色譜技術(shù)分離純化，得到對照品番瀉苷A、B，其結(jié)構(gòu)經(jīng)UV、IR、MS等波譜分析，結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道數(shù)據(jù)確定其結(jié)構(gòu)，并與日本進(jìn)口的番瀉苷

3、A以及中檢所購買的番瀉苷B作了對照品比對實(shí)驗(yàn)。在此基礎(chǔ)上，建立番瀉豆莢中番瀉苷A、B的含量測定方法，采用高效液相色譜法，色譜條件為：采用ODS色譜柱，乙腈：醋酸-0.1mol/L醋酸鈉緩沖液(pH5.0)(35:65)，該混合溶液1000ml中，加入四庚基溴化銨2.45g為流動相，檢測波長340nm，流速1.0ml/min。測定不同批號的六批番瀉豆莢樣品中番瀉苷A、B的含量，以二者含量之和為指標(biāo)，與番瀉葉中二者的含量做比較。
　　

4、結(jié)果：自制對照品番瀉苷A、B與日本進(jìn)口的番瀉苷A以及中檢所購買的番瀉苷B的對照品比對實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，日本進(jìn)口的番瀉苷A純度為99.697%，自制的番瀉苷A純度為99.510%；中檢所購買的番瀉苷B純度為97.883%，自制的番瀉苷A純度為99.557%。本研究還建立了簡便、快速的番瀉豆莢中番瀉苷A、B的含量測定方法。采用高效液相色譜法，測定了六批番瀉豆莢中番瀉苷A、B的含量，平均回收率：番瀉苷A:97.72%，RSD=0.54%；番瀉苷B

5、:97.57%，RSD=0.69%。線性范圍：番瀉苷A:0.482～3.856μg，rA=0.99998；番瀉苷B：1.036～8.288μg，rB=0.99996。以番瀉苷A、B的含量之和為指標(biāo)，六批番瀉豆莢的含量(mg/g)分別為：26.4039、22.5996、23.6430、25.7697、25.5793、29.0349；而與番瀉豆莢樣品測定方法完全相同的四批番瀉葉的含量(mg/g)為：15.2928、15.1983、13.21

6、34、12.5825，明顯低于番瀉豆莢中二者的含量之和。
　　結(jié)論：本課題建立了從番瀉葉中提取對照品番瀉苷A、B的方法，并建立了采用HPLC法測定番瀉豆莢中番瀉苷A、B的含量的方法。目前，國內(nèi)外文獻(xiàn)中均未見采用HPLC法測定番瀉豆莢中番瀉苷A、B含量的報(bào)道。本課題研究填補(bǔ)了這一空白，首次采用HPLC法測定了番瀉豆莢中番瀉苷A、B含量，所建立的方法簡便、快速、重現(xiàn)性好，證實(shí)了豆莢中含有與葉相同的瀉下有效成分番瀉苷A、B，且豆莢中二者