花粉管通道法將葉片衰老延緩基因P-,SAG12--IPT導(dǎo)入小麥品種的研究.pdf

1、n 女目—墜塹一女＆—＆—衛(wèi)_西弛農(nóng)林講捉大學(xué)2 0 0 7 屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位( 畢業(yè)) 論文花粉管通道法將葉片衰老延緩基因P 。：一lP T 導(dǎo)入小麥品種的研究學(xué)科專業(yè)也塑運(yùn)盞直挫堂研究方向 盛些生塑堇苤研究生廷 照指導(dǎo)教師 型匿丕煎攫完成時(shí)同 2 Q Q ! 生§且中國陜西楊凌占卡那霉素抗性株的1 6 ．6 ％，說明卡那霉素的初步篩選是有效的，其適宜濃度和時(shí)期為二葉一心一三葉- - , t ) + 2 0 0 0

2、0 m g ／L 卡那霉素。4 ．通過比較不同的D N A 溶劑對花粉管轉(zhuǎn)化小麥結(jié)實(shí)性的影響，結(jié)果表明表面活性劑顯著降低小麥結(jié)實(shí)率和種子發(fā)芽率，抑制種子發(fā)育，不宜作為轉(zhuǎn)化的外源D N A 溶劑。5 ．通過比較不同柱頭外露時(shí)間對對花粉管轉(zhuǎn)化小麥結(jié)實(shí)性的影響，結(jié)果表明柱頭活力對花粉管轉(zhuǎn)化小麥結(jié)實(shí)率影響顯著，柱頭外露時(shí)間超過8 d 的結(jié)實(shí)率顯著低于8 d 前的結(jié)實(shí)率，所以柱頭外露時(shí)間不宜超過8 d 。6 ．通過比較不同的D N A 濃度和轉(zhuǎn)化

3、時(shí)間對花粉管轉(zhuǎn)化小麥結(jié)實(shí)性的影響，結(jié)果表明轉(zhuǎn)化時(shí)間對結(jié)實(shí)率影響顯著，轉(zhuǎn)化時(shí)間為3 0 分鐘的結(jié)實(shí)率顯著低于6 0 分鐘和9 0 分鐘的結(jié)實(shí)率，所以轉(zhuǎn)化時(shí)間不應(yīng)低于6 0 分鐘：D N A 濃度對結(jié)實(shí)率影響可能存在品種間差異。D N A 濃度對豫麥1 8 結(jié)實(shí)率影響不顯著，而對鄭麥9 0 2 3 結(jié)實(shí)率影響顯著，濃度為7 0 0 n g ／u l結(jié)實(shí)率顯著高于3 0 0 n g ／u l 、5 0 0n g ／u l ，與對照0 n g

4、／u l 差異不顯著。7 ．利用花粉管通道法首次將葉片衰老延緩基因P s A O l 2 - - I P T 導(dǎo)入小麥品種鄭麥9 0 2 3和豫麥1 8 ，其中鄭麥9 0 2 3 一株，豫麥1 8 三株，總轉(zhuǎn)化效率為0 ．5 ‰，所有陽性植株都是來自人工授粉方式，轉(zhuǎn)化時(shí)間為6 0 分鐘，D N A 濃度為5 0 0 ．7 0 0 n g ／L ，以T E 或水作為D N A 溶劑的處理組合。關(guān)鍵詞：小麥；卡那霉素；花粉管通道法；遺傳轉(zhuǎn)化