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文檔簡介
1、該篇論文介紹了我們利用大豆為實驗材料,對衰老相關的蛋白激酶的磷酸化性質進行的研究以及對衰老相關的植物類受體蛋白激酶基因的克隆.運用生物化學方法,對一個可能與大豆葉片衰老及細胞分裂素延緩衰老相關的57KD鈣依賴蛋白激酶(CDPK)(王寧寧,1998)進行了體外磷酸化研究,證明該CDPK在體外具有非常強的自磷酸化活性;層析分析表明,其自磷酸化發(fā)生在絲氨酸和蘇氨酸殘基上,而在酪氨酸殘基上未發(fā)生自磷酸化.利用植物類受體蛋白激酶保守序列合成兼并引
2、物,利用RT-PCR方法從人工誘導衰老和6-BA延緩衰老以及正常條件下的大豆葉片中克隆與衰老相關的類受體蛋白激酶基因,并對其中的兩個片段-RLPK3和RLPK4進行了核酸和推測的氨基酸序列分析.為了獲得RLPK3和RLPK4的全長序列,使用CLONTECH設計的Race方法:以經過誘導處理、6-BA延緩衰老處理以及正常葉片的總RNA為模板反轉錄獲得全長cDNA;根據RLPK3和RLPK4的特殊序列合成特異性引物,以cDNA為模板進行了向
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