PEDF與VEGF在門靜脈高壓癥大鼠胃壁中的表達及意義.pdf

1、門靜脈高壓癥是以門靜脈壓力升高引起門靜脈系統(tǒng)血流動力學改變?yōu)樘卣鞯募膊?，出血是其主要臨床表現之一。其中最顯著，也最能引起醫(yī)生重視的是食管胃底靜脈曲張破裂出血。然而，近幾年對肝硬化門靜脈高壓癥血流動力學的深入研究以及胃鏡對出血部位的直接觀察，人們越來越多的注意到，在門靜脈高壓癥發(fā)生上消化道出血的病例中，有大約三分之一的出血并不是由食管胃底靜脈曲張破裂所致，而是由門靜脈高壓性胃病胃粘膜病變引起。門靜脈高壓性胃病出血在門靜脈高壓癥病人發(fā)生上消

2、化道出血中具有重要的地位。
　　 門靜脈壓力升高，肝硬化肝功能受損是門靜脈高壓性胃病形成的基本原因。門靜脈高壓癥時胃靜脈入肝血流受阻，毛細血管靜水壓升高，引起胃粘膜水腫。胃動脈血流灌注增加，動靜脈短路開放，粘膜細胞的氧代謝和營養(yǎng)物質代謝障礙，使胃的屏障功能減弱。血漿內皮素釋放增加，胰高血糖素、前列環(huán)素、內源性一氧化氮等激素代謝紊亂。肝硬化肝功能受損，內源性血管調節(jié)物質比例失調，胃粘膜血管自我調節(jié)能力降低，這些因素相互作用，導致門

3、靜脈高壓性胃病的發(fā)生。其中，胃的血管改變是門靜脈高壓性胃病發(fā)生出血的基礎，但是引起胃粘膜血管發(fā)生改變的機制尚未完全清楚。
　　 在合并有血管改變的疾病如視網膜病變或腫瘤中，促血管新生因子家族中的血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)呈高表達，血管新生抑制因子之一的色素上皮衍生因子(Pigment epithelium derived factor，PEDF)呈低表達，并

4、證實二者表達失衡是導致血管新生的根本機制。已有研究發(fā)現，在門靜脈高壓癥胃壁中，VEGF呈高表達，推測其可能與胃壁的血管改變有關。但是，PEDF在門靜脈高壓癥胃壁中是否有表達，對門靜脈高壓癥胃壁的血管改變是否取作用，目前仍不清楚。本實驗以門靜脈高壓癥大鼠作為研究對象，以PEDF和VEGF作為觀察指標，通過HE染色、免疫組化和Western Blot等方法檢測PEDF和VEGF在胃壁中的表達，初步探討其在門靜脈高壓癥胃壁血管改變中的作用，為

5、進一步闡明門靜脈高壓性胃病的發(fā)病機制奠定基礎。
　　 材料與方法：
　　 健康清潔級Wistar大鼠18只，雌雄不限，體重量(220±10)克，按隨機法分為實驗組(A組)和對照組(B組)，每組9只，實驗組大鼠應用經典的門靜脈部分縮窄法建立肝前性門靜脈高壓癥模型，對照組實施假手術，分別于術后7天、10天和14天給3只大鼠進行門靜脈主干壓力的測定，測壓后處死大鼠獲取胃底和胃體標本，通過HE染色觀察血管的病理改變，免疫組化和W

6、estern Blot方法檢測胃壁組織中PEDF和VEGF的表達位置和表達差異，并對Western Blot條帶進行掃描，對比兩組結果存在的差異。
　　 結果：
　　 1.按照經典方法建立的門靜脈高壓癥模型穩(wěn)定均一，術后7天A、B兩組大鼠的門靜脈壓力分別是11.85±0.67mmhg和6.81±0.28 mmhg，P＜0.05；術后10天A、B兩組大鼠的門靜脈壓力分別是12.64±0.35mmhg和6.88±0.81mm

7、hg，P＜0.05；術后14天A、B兩組大鼠門靜脈壓力分別是11.16±0.25mmhg和7.01±0.07mmhg，P＜0.05。術后7天、10天和14天三個時間點A大鼠門靜脈壓力明顯高于B組。
　　 2.術后7天、10天和14天A組大鼠胃壁HE染色可見大鼠胃粘膜下血管擴張、迂曲、內膜增厚。B組大鼠胃壁HE染色胃粘膜下血管未見擴張、迂曲和內膜增厚。
　　 3.免疫組化的結果顯示，A組VEGF、PEDF主要表達于粘膜層腺

8、體的基底層，在術后7天、10天和14天三個時間點VEGF的表達呈逐漸下降趨勢，PEDF的表達呈逐漸升高的趨勢。B組VEGF、PEDF僅有微弱表達，且三個時間點表達量
　　 4.Western Blot結果發(fā)現，A組大鼠胃壁PEDF與VEGF的相對表達量較B組均有升高。術后7天A、B兩組VEGF的相對灰度數值分別是903和194，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；術后10天A、B兩組VEGF的相對灰度數值分別是850和301，差

9、異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；術后14天A、B兩組VEGF的相對灰度數值分別是506和308，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。術后7天A、B兩組PEDF的相對灰度數值分別是196和92，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；術后10天A、B兩組PEDF的相對灰度數值分別是173和64，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；術后14天A、B兩組PEDF的相對灰度數值分別是347和150，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。