門靜脈高壓癥大鼠斷流術前后胃壁中缺氧誘導因子和血管內(nèi)皮生長因子表達的研究.pdf

1、第一部分門靜脈部分縮窄法門靜脈高壓癥大鼠模型的建立 目的：上消化道大出血是門靜脈高壓癥常見且致命的并發(fā)癥，是外科治療的重點。門靜脈高壓性胃病(portalhypertensivegastropathy，PHG)約占肝硬變門靜脈高壓癥患者的10％～70％，其所引起的出血僅次于食道胃底曲張靜脈破裂出血而居第二位。PHG出血是任何形式的斷流術后再出血的主要原因之一。建立大鼠門靜脈高壓癥模型，探討建模中的手術技巧，為探索人體門靜脈高壓性

2、胃病發(fā)病機制和早期診斷及治療的研究奠定基礎。 方法：采用門靜脈部分縮窄法制備肝前性門靜脈高壓癥(prehepaticportalhypertension，PHPH)大鼠模型80只，并設立假手術對照組(shamoperation，SO)60只；模型制備后14天施行賁門周圍血管離斷術。在每次取標本前，用7號針頭直接穿刺門靜脈測量游離門靜脈壓力(freeportalpressure，F(xiàn)PP)。統(tǒng)計學分析采用SPSS10.0軟件包處理數(shù)

3、據(jù)。 結論：本模型穩(wěn)定、可靠，經(jīng)過一定時間的訓練，可穩(wěn)定地用于實驗，是一種可靠的建模方法。 第二部分缺氧誘導因子和血管內(nèi)皮生長因子在門靜脈高壓癥大鼠胃壁中的表達及斷流術對其影響 目的：胃粘膜血液循環(huán)障礙是門靜脈高壓癥的重要病理生理變化和PHG的主要發(fā)生機制。胃粘膜缺血缺氧狀態(tài)誘導一系列特異性的與缺氧代謝、血管生成密切相關的基因，其中起關鍵作用的是缺氧誘導因子-1(hypoxiainduciblefactor-1，HI

4、F-1)。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β組成，HIF-1α決定HIF-1的活性。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是目前已知的最關鍵的血管生成促進因子，它的表達受各種因素調(diào)控，缺氧是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強的誘導VEGF表達的因素。CD34被廣泛用于標記血管內(nèi)皮細胞及檢測微血管密度(microvesseldensity，MVD)，特異性較高。本研究采用免疫組織化學技術檢測HIF

5、-1、VEGF和CD34在斷流術前后肝前型門靜脈高壓癥組和假手術對照組大鼠胃壁中的表達，探討HIF-1α和VEGF在斷流術前后PHG的發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床預防及診治PHG提供一定的理論依據(jù)。 方法：制備肝前性門靜脈高壓癥(prehepaticportalhypertension，PHPH)大鼠模型80只，并設立假手術對照組(shamoperation，SO)60只；模型制備后14天施行賁門周圍血管離斷術。分別在斷流術前及術后

6、7、14、30、60天分5批處死取材，因手術死亡等因素到最后取材時每次每組大鼠我們均隨機取8只。在每次取標本前，用7號針頭直接穿刺門靜脈測量游離門靜脈壓力(freeportalpressure，F(xiàn)PP)；免疫組化檢測HIF-1α、VEGF和CD34在大鼠胃壁組織中的表達，統(tǒng)計學分析采用SPSS10.0軟件包處理數(shù)據(jù)。 結論： 1.PHPH組FPP明顯高于SO組，提示門靜脈高壓狀態(tài)可能影響HIF-1α和VEGF的表達，從而

7、間接影響PHG的發(fā)生發(fā)展。 2.HIF-1α與VEGF在斷流術前PHPH組大鼠及PHPH和SO兩組大鼠斷流術后胃粘膜中高表達，提示HIF-1α和VEGF可能參與了PHG的發(fā)生發(fā)展。 3.MVD在斷流術前PHPH組大鼠胃壁中顯著增加，斷流術后進一步增加，提示新生血管的形成和胃粘膜缺血缺氧程度加重、胃粘膜出血幾率增加有關。 4.斷流術后兩組大鼠HIF-1α、VEGF和CD34明顯升高，胃粘膜病變加重，提示斷流術本身可