門靜脈高壓癥大鼠斷流術(shù)前后胃壁中缺氧誘導(dǎo)因子和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的研究.pdf

1、第一部分門靜脈部分縮窄法門靜脈高壓癥大鼠模型的建立 目的：上消化道大出血是門靜脈高壓癥常見且致命的并發(fā)癥，是外科治療的重點(diǎn)。門靜脈高壓性胃病(portalhypertensivegastropathy，PHG)約占肝硬變門靜脈高壓癥患者的10％～70％，其所引起的出血僅次于食道胃底曲張靜脈破裂出血而居第二位。PHG出血是任何形式的斷流術(shù)后再出血的主要原因之一。建立大鼠門靜脈高壓癥模型，探討建模中的手術(shù)技巧，為探索人體門靜脈高壓性

2、胃病發(fā)病機(jī)制和早期診斷及治療的研究奠定基礎(chǔ)。 方法：采用門靜脈部分縮窄法制備肝前性門靜脈高壓癥(prehepaticportalhypertension，PHPH)大鼠模型80只，并設(shè)立假手術(shù)對(duì)照組(shamoperation，SO)60只；模型制備后14天施行賁門周圍血管離斷術(shù)。在每次取標(biāo)本前，用7號(hào)針頭直接穿刺門靜脈測(cè)量游離門靜脈壓力(freeportalpressure，F(xiàn)PP)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS10.0軟件包處理數(shù)

3、據(jù)。 結(jié)論：本模型穩(wěn)定、可靠，經(jīng)過一定時(shí)間的訓(xùn)練，可穩(wěn)定地用于實(shí)驗(yàn)，是一種可靠的建模方法。 第二部分缺氧誘導(dǎo)因子和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在門靜脈高壓癥大鼠胃壁中的表達(dá)及斷流術(shù)對(duì)其影響 目的：胃粘膜血液循環(huán)障礙是門靜脈高壓癥的重要病理生理變化和PHG的主要發(fā)生機(jī)制。胃粘膜缺血缺氧狀態(tài)誘導(dǎo)一系列特異性的與缺氧代謝、血管生成密切相關(guān)的基因，其中起關(guān)鍵作用的是缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxiainduciblefactor-1，HI

4、F-1)。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β組成，HIF-1α決定HIF-1的活性。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是目前已知的最關(guān)鍵的血管生成促進(jìn)因子，它的表達(dá)受各種因素調(diào)控，缺氧是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的誘導(dǎo)VEGF表達(dá)的因素。CD34被廣泛用于標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞及檢測(cè)微血管密度(microvesseldensity，MVD)，特異性較高。本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)HIF

5、-1、VEGF和CD34在斷流術(shù)前后肝前型門靜脈高壓癥組和假手術(shù)對(duì)照組大鼠胃壁中的表達(dá)，探討HIF-1α和VEGF在斷流術(shù)前后PHG的發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床預(yù)防及診治PHG提供一定的理論依據(jù)。 方法：制備肝前性門靜脈高壓癥(prehepaticportalhypertension，PHPH)大鼠模型80只，并設(shè)立假手術(shù)對(duì)照組(shamoperation，SO)60只；模型制備后14天施行賁門周圍血管離斷術(shù)。分別在斷流術(shù)前及術(shù)后

6、7、14、30、60天分5批處死取材，因手術(shù)死亡等因素到最后取材時(shí)每次每組大鼠我們均隨機(jī)取8只。在每次取標(biāo)本前，用7號(hào)針頭直接穿刺門靜脈測(cè)量游離門靜脈壓力(freeportalpressure，F(xiàn)PP)；免疫組化檢測(cè)HIF-1α、VEGF和CD34在大鼠胃壁組織中的表達(dá)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS10.0軟件包處理數(shù)據(jù)。 結(jié)論： 1.PHPH組FPP明顯高于SO組，提示門靜脈高壓狀態(tài)可能影響HIF-1α和VEGF的表達(dá)，從而

7、間接影響PHG的發(fā)生發(fā)展。 2.HIF-1α與VEGF在斷流術(shù)前PHPH組大鼠及PHPH和SO兩組大鼠斷流術(shù)后胃粘膜中高表達(dá)，提示HIF-1α和VEGF可能參與了PHG的發(fā)生發(fā)展。 3.MVD在斷流術(shù)前PHPH組大鼠胃壁中顯著增加，斷流術(shù)后進(jìn)一步增加，提示新生血管的形成和胃粘膜缺血缺氧程度加重、胃粘膜出血幾率增加有關(guān)。 4.斷流術(shù)后兩組大鼠HIF-1α、VEGF和CD34明顯升高，胃粘膜病變加重，提示斷流術(shù)本身可