L-選擇蛋白與小鼠肝癌細(xì)胞Hepal-6淋巴道轉(zhuǎn)移潛能的相關(guān)性.pdf

1、本文選取小鼠肝癌細(xì)胞Hepa1-6為研究對象，通過L-選擇蛋白與小鼠淋巴結(jié)體外黏附實驗，分析L-選擇蛋白與腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移間的相關(guān)性；并檢測L-選擇蛋白與甘露糖受體(MR)的體外黏附，分析L-選擇蛋白與其配體-甘露糖受體(MR)間相互作用對腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響等。 實驗方法：構(gòu)建含有L-選擇蛋白的重組載體pcDNA3后轉(zhuǎn)染小鼠肝癌細(xì)胞Hepa1-6，篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)L-選擇蛋白的細(xì)胞株。采用免疫組化、免疫熒光、RT-PCR、流式

2、細(xì)胞技術(shù)等，輔之以體外黏附實驗分析肝癌細(xì)胞Hepa1-6表面L-選擇蛋白的表達(dá)情況、L-選擇蛋白與其配體-甘露糖受體(MR)間相互作用對腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響等，從而深入探討了L-選擇蛋白與腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移間的相關(guān)性。 實驗結(jié)果：大量提取重組質(zhì)粒，PCR結(jié)果顯示1118bp處有特異條帶，與預(yù)期片段大小一致。重組L-Selectin表達(dá)載體轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞Hepa1-6后48小時免疫熒光能檢測到目的蛋白的表達(dá)。G418篩選穩(wěn)定表達(dá)L-選