磁性納米粒子-反義核苷酸復(fù)合物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡的可視化研究.pdf

1、反義技術(shù)是目前癌癥治療領(lǐng)域很重要的一門技術(shù)。與傳統(tǒng)的化學(xué)療法相比，反義療法毒副作用更小，因?yàn)樵谥委熯^程中反義藥物能選擇性地進(jìn)入癌細(xì)胞，而有效地保護(hù)了正常細(xì)胞。其原理是反義核苷酸能與特定序列互補(bǔ)目標(biāo)mRNA結(jié)合，從而阻止了目標(biāo)基因表達(dá)。反義核苷酸就是這樣一種能阻止目標(biāo)基因表達(dá)并導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡的有效試劑。 運(yùn)用磁性納米粒子靶向給藥越來越引起人們的興趣，磁性納米粒子作為載體把抗癌藥物定向輸送到致癌部位，在臨床診斷和治療方面有巨大潛力

2、，正是基于這樣一種想法而建立起來的一種復(fù)合型納米靶向給藥系統(tǒng)。 本文建立一種有效的磁性靶向給藥系統(tǒng)——磁性納米粒子-反義核苷酸復(fù)合物，并用該復(fù)合物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡，用AFM等對HL-60細(xì)胞凋亡進(jìn)行可視化研究，主要做了以下工作。 1．通過不同種類納米粒子的量-效實(shí)驗(yàn)、時-效實(shí)驗(yàn)、徑-效實(shí)驗(yàn)來確定現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)條件下那些納米粒子具有細(xì)胞毒性，哪些納米粒子對細(xì)胞是安全的，并找出安全的時間及濃度范圍，為下一個階段的納米粒子-基

3、因藥物復(fù)合物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。 2．在磁性納米粒子表面包裹硅，制備磁性納米粒子-反義核苷酸復(fù)合物，用該復(fù)合物誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞，并做了量-效實(shí)驗(yàn)及時-效實(shí)驗(yàn)，MTT檢測，并用 TEM、AFM、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等定量、定性地表征細(xì)胞凋亡。 在表征細(xì)胞凋亡的手段上，我們探索了一種新型的表征方法：即用原子力學(xué)顯微鏡磁掃描觀察細(xì)胞凋亡。同時還運(yùn)用TEM、熒光顯微鏡等觀察細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞的凋亡形貌變得可視化。流式