天花粉蛋白誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、【目的】觀察天花蛋白(Trichosanthin，TCS)對(duì)人類髓系白血病細(xì)胞株HL.60細(xì)胞的增殖抑制及凋亡的影響，并揭示TCS誘導(dǎo)HL.60細(xì)胞凋亡與線粒體跨膜電位(△Ψm)、Bcl-2、p53之間的關(guān)系。 【方法】采用MTT比色法測(cè)定TCS對(duì)HL.60細(xì)胞的增長(zhǎng)抑制率；經(jīng)瑞士.吉姆薩(Wright-Gemsa)染色，光鏡下觀察TCS處理后細(xì)胞的形態(tài)改變；用AnnexinV-FITC/PI雙重標(biāo)記，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞早期凋

2、亡率的變化；應(yīng)用羅單明123(Rhl23)染色，經(jīng)流式細(xì)胞儀分析，檢測(cè)線粒體跨膜電位的改變；用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)HL.60細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2、p53蛋白的表達(dá)。 【結(jié)果】(1)TCS抑制HL.60細(xì)胞的增殖，促進(jìn)其凋亡，隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)、TCS濃度的增加，增殖抑制及促凋亡作用更加明顯；(2)TCS作用后，線粒體的膜電位隨凋亡細(xì)胞的增加而逐漸降低；(3)TCS作用后Bcl-2的表達(dá)顯著下降，而p53的表達(dá)明顯提高。