綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染C6膠質(zhì)瘤細胞建立大鼠腫瘤模型及透明質(zhì)酸對其侵襲與增殖的影響.pdf

1、該研究首先采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,在體外將外源性EGFP(Enhanced GreenFluorescent protein)基因轉(zhuǎn)染入C6膠質(zhì)瘤細胞,利用含G418的培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞并擴增培養(yǎng).將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染目的基因和對照空載體的細胞分別命名為C6-E-N細胞和C6-N細胞.采用流式細胞儀、透射電鏡檢測外源基因?qū)D(zhuǎn)染細胞周期和超微結(jié)構(gòu)的影響:通過繪制細胞生長曲線和MTT實驗,檢測EGFP基因?qū)D(zhuǎn)染細胞體外增殖速率和生長活力的影響:熒光顯微

2、鏡檢測轉(zhuǎn)染細胞目的基因的表達;裸鼠致瘤性實驗檢測轉(zhuǎn)染細胞的體內(nèi)致瘤性改變.研究結(jié)果表明:1.EGFP基因在體外穩(wěn)定轉(zhuǎn)染C6膠質(zhì)瘤細胞系,對瘤細胞的細胞周期、超微結(jié)構(gòu)、增殖速率、裸鼠致瘤性均無明顯影響.轉(zhuǎn)染該基因的C6細胞在體外可穩(wěn)定表達EGFP:2.移植C6-E-N細胞于大鼠腦內(nèi),建立大鼠腦內(nèi)膠質(zhì)細胞瘤模型,瘤組織呈侵襲性生長,符合膠質(zhì)細胞瘤體內(nèi)侵襲模型的標準,熒光顯微鏡檢測瘤細胞的侵襲性,其陽性率明顯高于傳統(tǒng)的HE染色和GFAP免疫組