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1、目的:培育表達綠色熒光蛋白(GFP)的裸小鼠,并探討將其用于人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(HGSCs)移植實驗研究。 方法:將C57BL/6J-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠與NC系裸小鼠進行交配,在繼代時嚴(yán)格挑選都表達GFP的無毛雄鼠(♂)與有毛母鼠(♀)交配,通過肉眼、免疫組織化學(xué)和熒光顯微鏡等方法觀察GFP在裸小鼠皮膚和臟器中的表達情況,繼將HGSCs原位移植于表達GFP的裸小鼠,以觀察移植瘤的生長情況。 結(jié)果:傳至8代的裸小鼠,包括腦在內(nèi)的
2、全身主要器官和細(xì)胞都表達GFP。對用于HGSCs原位移植的腦,能清哳辨認(rèn)出不發(fā)光的瘤細(xì)胞和發(fā)光的宿主細(xì)胞。而瘤細(xì)胞經(jīng)人特異白細(xì)胞抗體(HLA)連接紅色熒光劑(PE)的免疫組織化學(xué)染色后,在共聚焦顯微鏡下可清晰顯示與宿主腦細(xì)胞的組織學(xué)關(guān)系。 結(jié)論:用免疫功能健全、表達GFP的轉(zhuǎn)基因鼠與免疫功能缺陷的裸小鼠雜交,可獲得腦等組織器官表達GFP的裸小鼠。對其進行HGSCs原位移植,因可清晰辨認(rèn)移植瘤與宿主組織的關(guān)系而有望用于腫瘤組織重構(gòu)
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