干擾podoplanin的表達(dá)對(duì)人早孕期蛻膜基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能影響的研究.pdf

1、目的:探討跨膜糖蛋白podoplanin在人早孕期母胎界面的表達(dá)及其對(duì)蛻膜基質(zhì)細(xì)胞增殖及侵襲等生物學(xué)功能的影響。
　　 方法:收集正常早孕期蛻膜及絨毛組織，應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)室建立的胰酶消化、密度梯度離心法分離和培養(yǎng)蛻膜基質(zhì)細(xì)胞(decidual stromal cells，DSCs)和滋養(yǎng)細(xì)胞(trophoblasts，Tros)。采用免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)以及流式細(xì)胞術(shù)分別檢測podoplanin和及其受體C型凝集素樣受體-2(

2、C-type lectin-like receptor-2，CLEC-2)的表達(dá)水平和特點(diǎn);并以siRNA干擾技術(shù)沉默蛻膜基質(zhì)細(xì)胞podoplanin的表達(dá)，然后采用MTT比色法檢測其活力、BrdU細(xì)胞增殖ELISA法檢測其增殖能力、以流式細(xì)胞術(shù)分析其凋亡情況以及Transwell法分析podoplanin沉默后細(xì)胞侵襲能力的改變。
　　 結(jié)果:正常早孕蛻膜基質(zhì)細(xì)胞和滋養(yǎng)細(xì)胞均表達(dá)podoplanin和CLEC-2，podopl

3、anin在DSCs的表達(dá)水平顯著高于Tros者，而CLEC-2在Tros和DSCs中表達(dá)水平均較低;采用siRNA干擾podoplanin在DSCs的表達(dá)后，在顯著降低細(xì)胞活力并抑制細(xì)胞增殖和侵襲能力的同時(shí)，促進(jìn)了該細(xì)胞的凋亡。
　　 結(jié)論:人早孕期母-胎界面均表達(dá)podoplanin及其受體CLEC-2，且podoplanin在蛻膜基質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)水平較高，提示podoplanin可能通過與內(nèi)源性受體CLEC-2的相互作用參與調(diào)