JNK-SAPK及Akt信號(hào)通路在人結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展和多藥耐藥中的作用.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文JNKSAPK及Akt信號(hào)通路在人結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展和多藥耐藥中的作用姓名：朱明明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師：冉志華201104上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文中文摘要摘要2JNK／SAPK信號(hào)通路在人結(jié)腸癌羥基喜樹(shù)堿多藥耐藥中的作用目的：探討JNK／SAPK信號(hào)通路在羥基喜樹(shù)堿誘導(dǎo)的結(jié)腸癌細(xì)胞耐藥過(guò)程中的作用，以及對(duì)耐藥轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)和轉(zhuǎn)運(yùn)功能的調(diào)控。方法g我們以親本細(xì)胞株SWlll6和耐藥細(xì)

2、胞株SWl116／HCPT為研究對(duì)象，先檢測(cè)兩種細(xì)胞中JNK活性的變化，并以可抑制JNK活化的特異性抑制劑SP600125和州K1／2siI塒A為工具，阻斷JNK信號(hào)傳導(dǎo)通路，觀察耐藥細(xì)胞中INK活性、耐藥蛋白的表達(dá)、藥物外排情況、細(xì)胞凋亡以及對(duì)羥基喜樹(shù)堿敏感性的變化，以探討JNK信號(hào)通路與結(jié)腸癌細(xì)胞耐羥基喜樹(shù)堿機(jī)制之間的內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在耐藥細(xì)胞SWIl16／HCPT中INK、cJun、ATF2的磷酸化水平明顯高于親本細(xì)胞SW

3、lll6。用SP600125可明顯抑制JNK通路活性，在作用48h后可使耐藥細(xì)胞中耐藥蛋白ABCG2的mRNA水平下降6783士310％，蛋白水平下降5429a：519％，細(xì)胞內(nèi)Rhl23的蓄積量增加了476029倍。SP600125還可促進(jìn)凋亡蛋白PARP的剪切，下調(diào)抗凋亡蛋白survivin和bcl2的表達(dá)，明顯增加耐藥細(xì)胞對(duì)羥基喜樹(shù)堿的敏感性。JNKl和YNK2兩個(gè)靶基因靜默引起的生物學(xué)效應(yīng)卻不相同：JNKl基因靜默能加強(qiáng)下游cJ

4、un、ATF2蛋白的去磷酸化，明顯下調(diào)ABCG2基因和蛋白水平的表達(dá)及耐藥蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)功能，能顯著增加耐藥細(xì)胞對(duì)羥基喜樹(shù)堿的敏感性。而JNK2基因靜默對(duì)下游轉(zhuǎn)錄因子的活性無(wú)明顯影響，雖可下調(diào)ABCG2mRNA的表達(dá)水平，但對(duì)ABCG2蛋白表達(dá)卻無(wú)明顯調(diào)節(jié)功能，也不能增加耐藥細(xì)胞對(duì)羥基喜樹(shù)堿的敏感性。結(jié)論：JNK通路參與了羥基喜樹(shù)堿誘導(dǎo)的結(jié)腸癌多藥耐藥，其高表達(dá)預(yù)示了化療效果不佳，抑制其通路可能成為逆轉(zhuǎn)耐藥的新靶點(diǎn)。但不同的INK異構(gòu)體在羥基