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文檔簡(jiǎn)介
1、本文對(duì)Zwittermicin A生物合成相關(guān)基因tzwM、tzwO進(jìn)行了探討。本研究分別克隆了tzwM和tzwO的全長基因,并在大腸桿菌BL21中進(jìn)行了融合表達(dá)及純化。通過等位基因交換的方法,構(gòu)建了tzwM基因突變盒M和tzwO基因突變盒O,分別將其插入溫度敏感的E. coli-Bt穿梭載體pRN5101得到突變質(zhì)粒pRNM和pRNO。導(dǎo)入產(chǎn)Zwittennicin A的Bt菌株G03,經(jīng)高溫突變分別獲得tzwM、tzwO的突變株各3
2、株,將tzwM的突變株命名:G03△tzwM-101,G03△tzwM-140和G03△tzwM-262,將tzwO的突變體命名為:G03△tzwO-89,G03△tzwO-144和G03△tzwO-184。運(yùn)用Southern blotting的方法,分別驗(yàn)證了突變體G03△tzwM-101和G03△tzwO-184的正確性;通過其對(duì)歐文氏桿菌的抑菌活性表明各突變株均喪失了抑菌活性;質(zhì)譜分析未檢測(cè)到ZwittermicinA;對(duì)突變體
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