枇杷果實(shí)乙烯生物合成及相關(guān)基因表達(dá)研究.pdf

1、本文以非躍變型果實(shí)‘洛陽(yáng)青’枇杷為材料,研究了不同發(fā)育階段和采后貯藏條件下果實(shí)乙烯生物合成及相關(guān)基因表達(dá),探索了乙烯生物合成調(diào)控枇杷果實(shí)發(fā)育、成熟衰老及非生物逆境響應(yīng)的相關(guān)生物學(xué)機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　 根據(jù)果皮色澤指標(biāo)(CCI),將枇杷果實(shí)發(fā)育階段分為五個(gè)時(shí)期:SI(CCI:＜-9)、S2(CCI:-6～-4)、S3(CCI:-1～1,轉(zhuǎn)色期)、S4(CCI:3～5)、S5(CCI:9～11)(成熟采收期)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):‘

2、洛陽(yáng)青’果實(shí)發(fā)育過(guò)程乙烯釋放量和呼吸強(qiáng)度均呈峰型變化趨勢(shì),且均在轉(zhuǎn)色期(S3)達(dá)到高峰;采后20℃貯藏果實(shí)乙烯釋放量和呼吸強(qiáng)度都很低且呈下降趨勢(shì),0℃貯藏顯著抑制果實(shí)乙烯釋放和呼吸強(qiáng)度。
　　 利用簡(jiǎn)并引物,從枇杷中克隆得到三個(gè)乙烯生物合成相關(guān)基因成員,分別為EjACS1、EjACO1和EjACO2,序列分析表明它們分別與PbACS2(94％),MdACO1(96％),PPACO1(96％)有最高的氨基酸序列一致性。
　　

3、 利用實(shí)時(shí)定量PCR(Q-PCR)研究基因表達(dá),結(jié)果顯示:EjACS1和EjACO1表達(dá)具有果實(shí)組織特異性,而EjACO2在葉,花,果實(shí)中均有較高表達(dá);果實(shí)發(fā)育階段EjACO2的表達(dá)模式與乙烯變化趨勢(shì)一致,在轉(zhuǎn)色期果實(shí)中EjACO2基因表達(dá)最強(qiáng),EjACS1和EjACO1在果實(shí)發(fā)育后期表達(dá)增強(qiáng);果實(shí)采后20℃貯藏過(guò)程中三個(gè)基因表達(dá)都維持在較低水平,且EjACS1和EjACO2呈下降的表達(dá)模式;0℃貯藏下,EjACS1和EjACO2表達(dá)

4、略微上升并高于常溫對(duì)照果實(shí);20℃低濕條件下貯藏6～8 d的果實(shí)中EjACS1、EjACO1和EjACO2表達(dá)顯著下降;機(jī)械傷處理誘導(dǎo)果實(shí)中EjACS1和EjACO2的表達(dá),但EjACO1表達(dá)基本維持穩(wěn)定。
　　 本試驗(yàn)首次從枇杷中克隆獲得三個(gè)乙烯生物合成相關(guān)基因并進(jìn)行基因表達(dá)研究,發(fā)現(xiàn)果實(shí)發(fā)育階段轉(zhuǎn)色期乙烯和呼吸均呈峰型變化趨勢(shì),EjACO2可能是其關(guān)鍵基因,參與果實(shí)成熟啟動(dòng);果實(shí)采后不同貯藏條件下,三個(gè)基因呈現(xiàn)不同表達(dá)模式,