高眼壓致人和家兔角膜內(nèi)皮損傷過程中水通道蛋白1的表達(dá)變化.pdf

1、目的：通過檢測(cè)并比較在高眼壓作用下，家兔和人的角膜內(nèi)皮細(xì)胞中水通道蛋白1(AQP1)的表達(dá)變化，進(jìn)一步探討AQP1基因在角膜水轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用。 方法：1、30只成年家兔隨機(jī)分為五組，分別為對(duì)照組、2周組、3周組、4周組和5周組，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組家兔左眼前房注入復(fù)方卡波姆溶液制作慢性高眼壓模型，對(duì)照組左眼前房注入平衡鹽液0.2mL，注藥后每天測(cè)量眼壓一次，裂隙燈下觀察眼結(jié)膜、角膜及虹膜等反應(yīng)變化。每周采用非接觸式角膜內(nèi)皮鏡測(cè)量角膜內(nèi)皮細(xì)胞

2、密度( ECD)、內(nèi)皮細(xì)胞面積變異系數(shù)(CV)。注藥后2、3、4、5周，應(yīng)用免疫組織化學(xué)和半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)( semi-quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)方法檢測(cè)家兔角膜內(nèi)皮AQP1的表達(dá)變化，并比較其差異。2、用RT-PCR方法檢測(cè)人的正常透明角膜和長(zhǎng)期高眼壓作用的角膜內(nèi)皮AQP1的表達(dá)變化，并比較其差異。 結(jié)果：1、家

3、兔各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的眼壓和角膜內(nèi)皮的ECD和CV值的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).2、免疫組化和RT-PCR測(cè)定家兔各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的AQP1的蛋白和mRNA的表達(dá)量，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0，05)。3、家兔各組數(shù)據(jù)變化呈相關(guān)性，隨著眼壓的升高和恢復(fù)，角膜內(nèi)皮的ECD先下降后上升，AQP1的蛋白表達(dá)和mRNA的表達(dá)量亦隨之出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。4、人的AQPlmRNA的表達(dá)量，對(duì)照組高于病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)