小鼠脊髓損傷過程中組織形態(tài)學及相關(guān)基因表達的初步研究.pdf

1、脊髓損傷(SCI)，包括機械性損傷和繼發(fā)性損傷，是一個在所有年齡段都可能出現(xiàn)的由中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)受到創(chuàng)傷所導致的運動和感覺的功能障礙。發(fā)生脊髓損傷后，脊髓的結(jié)構(gòu)和功能的恢復十分困難，也正因為如此，它一直是當今醫(yī)學界急需解決的一項重大課題。伴隨著動物個體脊髓損傷的進程，脊髓組織內(nèi)發(fā)生著一連續(xù)的形態(tài)組織學變化，如局部出血，缺血與水腫。往往同時發(fā)生著一連串細胞內(nèi)外和細胞間的事件，包括電解質(zhì)失衡、炎癥機制的發(fā)生、血管機制、細胞結(jié)構(gòu)和組分的

2、變化。所以，研究脊髓損傷及其復雜的病理進程具有重要意義。
　　本研究以小鼠脊髓損傷模型為基礎(chǔ)，針對損傷后的不同時期進行研究，通過組織形態(tài)學、免疫組織化學和mRN A差異顯示技術(shù)相互結(jié)合的方法，從多種角度出發(fā)，研究并探討脊髓損傷后的生理變化及其不同時期差異基因的表達。
　　1.本實驗成功的建立了小鼠脊髓損傷的模型，通過形態(tài)學觀察，通過蘇木精-伊紅和尼氏染色的方法，發(fā)現(xiàn)在脊髓損傷后的不同時期，損傷部位及其周圍組織發(fā)生著一連續(xù)的形

3、態(tài)組織學變化。
　　2.在小鼠脊髓損傷模型建立的基礎(chǔ)上，通過免疫組織化學的方法，發(fā)現(xiàn)在脊髓損傷后的不同時期，相關(guān)凋亡基因的陽性表達發(fā)生著變化。結(jié)果顯示，伴隨著脊髓損傷的進程發(fā)生著細胞凋亡，同時，BMP-Smad信號通路也許也參與其中，它們相互之間具有十分密切的關(guān)系。
　　3.通過mRNA差異顯示技術(shù)，研究脊髓損傷后的不同時期，小鼠損傷部位脊髓mRNA的差異性表達。本實驗使用3條錨定引物和20條隨機引物，隨機搭配而成多種引物組