腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶導(dǎo)向肽篩選及靶向性治療的研究.pdf

1、[目的]利用細菌鞭毛隨機肽庫篩選靶向腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的導(dǎo)向性多肽。 [方法]利用細菌鞭毛肽庫對高轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞PC-3M-1E8和不轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞PC-3M-2B4進行四輪正負篩選；免疫熒光法體外驗證特異性與PC-3M-1E8細胞親和的細菌克隆，獲得重復(fù)性多肽序列；化學(xué)合成TMP1肽，免疫熒光法和競爭性拮抗實驗驗證其與不同轉(zhuǎn)移潛能前列腺癌細胞和乳腺癌細胞的特異性親和；構(gòu)建荷瘤小鼠模型，體內(nèi)驗證TMP1肽對高轉(zhuǎn)移腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的

2、靶向性。 [結(jié)果]通過細菌鞭毛肽庫對高轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞PC-3M-1E8和不轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞PC-3M-2B4進行四輪正負篩選，獲得了若干能與高轉(zhuǎn)移PC-3M-1E8細胞親和的細菌克隆；通過免疫熒光法體外驗證，篩選到一段5肽序列(ABDEF)，命名為“TMP1”；免疫熒光法的體外驗證再次證實，TMP1肽對高轉(zhuǎn)移PC-3M-1E8細胞有很好的親和作用，而對不轉(zhuǎn)移前列腺癌PC-3M-2B4細胞無識別，序列隨意重新排列后的錯序肽對照與

3、PC-3M-1E8細胞無親和作用，說明TMP1肽對高轉(zhuǎn)移PC-3M-1E8細胞的親和作用是具有特異性的；競爭性拮抗實驗也進一步證實了這點；此外，TMP1肽對高、中等轉(zhuǎn)移潛能的乳腺癌細胞MDA-MB-435S和MDA-MB-231具有很好的親和能力，而對于低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞MCF-7細胞無識別。 TMP1肽體內(nèi)實驗證實，TMP1肽對源于PC-3M-1E8的高轉(zhuǎn)移前列腺癌腫瘤有很好的靶向識別，而對不轉(zhuǎn)移前列腺癌PC-3M-2B4腫

4、瘤無識別，序列隨意重新排列后的錯序肽對PC-3M-1E8腫瘤無靶向作用；另外，TMP1肽對高轉(zhuǎn)移潛能的MDA-MB-435S乳腺癌具有很好的靶向能力；此外，TMP1肽對腫瘤的轉(zhuǎn)移灶有很好的識別能力，PC-3M-1E8腫瘤的自發(fā)肝轉(zhuǎn)移灶即使直徑僅有1mm，處于亞臨床腫瘤狀態(tài)，亦可被TMP1肽很好的靶向。 [結(jié)論]通過肽庫技術(shù)篩選獲得的TMP1肽作為一種腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的導(dǎo)向性多肽，如果偶聯(lián)上顯影劑或抗腫瘤藥物，可以很好的用于腫瘤及其