人胚神經(jīng)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定及Musashi1蛋白的原核表達(dá).pdf

1、神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有自我更新能力、高增殖潛能及多分化潛能的細(xì)胞,存在于胚胎和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦室周圍及其它區(qū)域.神經(jīng)干細(xì)胞可被用于神經(jīng)發(fā)育機(jī)制的研究、神經(jīng)組織損傷的修復(fù)、神經(jīng)退行性疾病的移植治療以及作為基因治療的細(xì)胞載體.神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定則是這些研究的重要基礎(chǔ).Musashil是一個(gè)種系發(fā)育保守的RNA結(jié)合蛋白,在無(wú)脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物中都有表達(dá),其發(fā)揮調(diào)控作用的模式可能是通過(guò)在翻譯水平抑制m-Numb基因,而激活Notch信

2、號(hào)通道.Musashil能在中樞神經(jīng)系統(tǒng)祖細(xì)胞(包括神經(jīng)干細(xì)胞)內(nèi)選擇性表達(dá),已經(jīng)作為一種標(biāo)志蛋白,被廣泛用于神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定.本研究通過(guò)原代培養(yǎng)、自然篩選,從人胚腦組織成功分離、鑒定了神經(jīng)干細(xì)胞,并完成了其傳代培養(yǎng),為進(jìn)一步的干細(xì)胞移植研究準(zhǔn)備了寶貴的干細(xì)胞資源.本研究還通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR反應(yīng),獲取了完整的人Musashil蛋白的編碼序列;將其克隆到表達(dá)載體后,成功糾正了編碼序列中的錯(cuò)配堿基;將含正確編碼序列的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主菌,經(jīng)誘導(dǎo)