神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及移植治療大鼠腦出血的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1、建立穩(wěn)定的胚胎神經(jīng)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法體系.2、進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦出血的初步嘗試.實(shí)驗(yàn)方法:取胚齡14-16天SD大鼠腦組織采用無血清培養(yǎng)方法,在bFGF(堿性成纖維細(xì)胞生長因子basic fibroblast growthfactor)作用下培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞.去除生長因子加5％胎牛血清條件下進(jìn)行分化培養(yǎng).采用熒光免疫組化方法鑒定培養(yǎng)所得神經(jīng)干細(xì)胞團(tuán)和其分化后的細(xì)胞.制作大鼠腦出血模型,分為模型對照組、出血3天標(biāo)記干細(xì)胞注入

2、組、出血7天標(biāo)記干細(xì)胞注入組、bFGF注入組.觀察其功能恢復(fù)和干細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)增殖情況.討論:神經(jīng)干細(xì)胞是一種未分化狀態(tài)的原始神經(jīng)前體細(xì)胞,具有自我更新、多方向分化潛能、低免疫原性三個特點(diǎn).非常適合神經(jīng)組織損傷后的移植,研究神經(jīng)干細(xì)胞對腦出血后缺損神經(jīng)組織的修復(fù)替代以及功能改善具有十分重要的理論意義和實(shí)用價值.成年個體環(huán)繞側(cè)腦室的室管膜下層、紋狀體、海馬等地方存在神經(jīng)干細(xì)胞,正常情況下這些細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài),如能將其在體內(nèi)誘導(dǎo)增殖、分

3、化以替代疾病中缺損的神經(jīng)細(xì)胞,將為神經(jīng)損傷的修復(fù)帶來新的希望.不同部位,不同種類神經(jīng)元的再生、分化各有其特點(diǎn),需要不同調(diào)節(jié)因子的精確控制,因此,闡明不同調(diào)節(jié)因子在神經(jīng)中樞不同部位的調(diào)節(jié)特性也是今后神經(jīng)干細(xì)胞研究的一項(xiàng)重要內(nèi)容.盡管目前尚不能準(zhǔn)確有效的誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞特異性定向分化為某種特定的神經(jīng)元,但隨著人們對細(xì)胞間信號傳遞機(jī)制認(rèn)識的不斷加深和新的細(xì)胞因子、化學(xué)信號的不斷發(fā)現(xiàn),人類將能夠解決從全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞到神經(jīng)干細(xì)胞、定向神經(jīng)祖