姜黃素通過調(diào)節(jié)NGAL基因表達對乳腺癌MDA-MB-23細(xì)胞侵襲能力的影響.pdf

1、目的:通過研究姜黃素對侵襲相關(guān)因子中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)表達的調(diào)控，初步探討姜黃素在防治乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中可能存在的新作用機制。
　　 方法:以高侵襲性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231為研究對象，采用不同劑量姜黃素處理并使用NF-κB特異性抑制劑Bay-117082（20μmol/L）對比觀察。MTT法檢測姜黃素對細(xì)胞的毒性作用，Transwell Matrigel法觀察細(xì)胞的侵襲能力，黏附實驗觀察細(xì)胞的黏附

2、能力，Western blot檢測細(xì)胞中NGAL、MMP-9、IκBα及P-IκBα蛋白的表達水平，RT-PCR檢測細(xì)胞中NGAL、MMP-9 mRNA的轉(zhuǎn)錄水平，明膠酶譜法檢測細(xì)胞中MMP-9活性的變化。
　　 結(jié)果:姜黃素對乳腺癌細(xì)胞生長的抑制呈時間和劑量依耐性。但當(dāng)作用時間≤24h，劑量≤15μM時對細(xì)胞無明顯毒性作用。Transwell侵襲實驗和黏附實驗結(jié)果顯示，隨著姜黃素濃度的增加細(xì)胞降解Matrigel及隨后穿膜能力

3、和黏附能力逐漸降低，以15μM姜黃素作用效果最強，與NF-κB特異性抑制劑Bay-117082作用相似。Western blot結(jié)果顯示，姜黃素對NGAL、MMP-9、P-IκBα蛋白表達的抑制作用呈劑量依賴性，且15μM姜黃素作用效果與NF-κB特異性抑制劑Bay-117082相似;但姜黃素及Bay-117082對IκBα的蛋白表達無明顯影響。RT-PCR結(jié)果顯示姜黃素顯著抑制NGAL及MMP-9 mRNA表達，其抑制作用呈濃度依賴性