轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βⅡ型受體—IgG Fc嵌合蛋白基因治療改善環(huán)孢霉素A腎毒性.pdf

1、本文研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βⅡ型受體-IgGFc嵌合蛋白的基因治療改善環(huán)孢霉素A的腎臟毒性。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)在環(huán)孢霉素A(CsA)所致腎臟毒性的發(fā)病過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用。本研究旨在探討TGFβRⅡ/IgGFc基因轉(zhuǎn)染對(duì)小鼠CsA腎毒性的作用。 方法：雌性ICR小鼠予低鈉飲食，CsA用藥組每日皮下注射CsA25mg/Kg。在給藥的第1天和第7天，對(duì)照組在布比卡因預(yù)處理的脛骨肌處注射50ug質(zhì)粒CAGGS-β半乳糖苷酶(la

2、cZ)(pCAGGS-βgalactosidase(lacZ))，治療組注射等量質(zhì)粒CAGGS-TGFβRⅡ/IgGFc(pCAGGS-TGFβRⅡ/IgGFc)，均聯(lián)合電穿孔，在CsA給藥兩周或三周后處死。腎組織中TGFβ1mRNA水平用Northernblot測(cè)定，腎組織和血漿中TGFβ1蛋白水平由免疫組化和ELISA法測(cè)得。利用石蠟切片PAS和Masson’strichrom染色半定量評(píng)分評(píng)估腎小管損害和腎間質(zhì)纖維化程度，免疫組化

3、方法檢測(cè)小管間質(zhì)F4/80陽(yáng)性的巨噬細(xì)胞的表達(dá)。 結(jié)果：CsA給藥2周后，對(duì)照組血漿和腎臟TGFβ1表達(dá)最高，然后降至基線水平。而TGFβ1的mRNA水平直到給藥三周仍持續(xù)增高。TGFβRⅡ/IgGFc干預(yù)組，2周時(shí)血漿TGFβ1水平與不用藥的低鈉飲食對(duì)照組相仿，腎組織TGFβ1表達(dá)較CsA對(duì)照組降低50％(P＜0.01)，對(duì)小管間質(zhì)病變有保護(hù)作用(P＜0.01)。第三周時(shí)，干預(yù)組的腎臟mRNA水平和蛋白水平較對(duì)照組沒(méi)有明顯改變，但小管