畢赤酵母產(chǎn)木聚糖酶的發(fā)酵工藝研究.pdf

1、半纖維素是僅次于纖維素含量第二豐富的可利用自然資源，其主要成分是木聚糖。木聚糖酶以內(nèi)切方式作用于木聚糖分子中β-1，4-木糖苷鍵，可將木聚糖水解為木二糖和木二糖以上的低聚木糖，以及少量木糖和阿拉伯糖，在飼料、造紙和食品等行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 本文對畢赤酵母產(chǎn)木聚糖酶的發(fā)酵條件進(jìn)行研究，得到的主要結(jié)論如下：
　　 1.通過單因素實(shí)驗(yàn)顯示，麥麩是最佳碳源，酵母浸膏要優(yōu)于其他有機(jī)氮源和無機(jī)氮源，最佳接種時(shí)間為24 h

2、，接種量為10％，最佳初始培養(yǎng)基pH為5.5，此條件下最高酶活達(dá)到1600IU·mL-1。
　　 2.該巴斯德畢赤酵母菌株所產(chǎn)木聚糖酶具有較好的耐熱性，最適酶促反應(yīng)溫度是70℃。
　　 3.發(fā)酵培養(yǎng)基得到了改進(jìn)，利用更加廉價(jià)的廢酵母水解液替代酵母膏，最佳添加量為4％。
　　 4.對麥麩進(jìn)行水解預(yù)處理，能更有效的誘導(dǎo)木聚糖酶的表達(dá)，并確定了初始最佳麥麩水解液的添加量為20％。通過優(yōu)化培養(yǎng)基，酶活達(dá)到3000 IU·

3、mL-1左右。
　　 5.對畢赤酵母的細(xì)胞通透性和5 L發(fā)酵罐分批發(fā)酵工藝進(jìn)行了初步研究，添加表面活性劑吐溫-80能促進(jìn)產(chǎn)酶，在發(fā)酵20 h后開始添加，濃度為0.2％，確定了最佳的甲醇誘導(dǎo)時(shí)間為18 h后，采取甲醇流加誘導(dǎo)模式進(jìn)行木聚糖酶的誘導(dǎo)表達(dá)，酶活達(dá)到3479 IU·mL-1，對甘油補(bǔ)料策略進(jìn)行了初步研究。
　　 本課題建立了畢赤酵母利用麥麩和廢酵母等廉價(jià)的原料作為發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)木聚糖酶的發(fā)酵工藝，與在國內(nèi)其他畢赤酵