金釵石斛內(nèi)生菌多樣性與石斛堿含量的相關(guān)性研究.pdf

1、植物內(nèi)生菌能與宿主形成互利共生關(guān)系，從而促進宿主生長和發(fā)育，并產(chǎn)生與次生代謝相同或類似的物質(zhì)，在植物微生態(tài)系統(tǒng)中具有重要作用。本研究基于免培養(yǎng)技術(shù)和高通量測序，研究金釵石斛（Dendrobium nobile Lindl）種子、組培苗和仿野生植株的根、莖和葉中的內(nèi)生菌及其根際土壤微生物的多樣性，利用氣相色譜法檢測金釵石斛石斛堿含量，并通過統(tǒng)計分析，分析金釵石斛內(nèi)生菌的結(jié)構(gòu)組成與石斛堿含量的相關(guān)性。取得主要結(jié)果如下：
　　1.金釵石

2、斛種子內(nèi)生細菌主要包括變形菌門和藍細菌門，13個屬，變形菌門為主要類群，泛菌屬（Pantoea）為優(yōu)勢屬。香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)分別為1.822和0.689，chao1指數(shù)為11。組培苗內(nèi)生細菌主要包括變形菌門、藍細菌門和厚壁菌門，變形菌門和藍細菌門為主要類群，根、莖和葉內(nèi)生細菌分屬于12、16和15個屬，優(yōu)勢屬均為泛菌屬。香農(nóng)指數(shù)分別為0.960、1.557和1.352，辛普森指數(shù)分別為0.425、0.567和0.509，chao1指數(shù)

3、為16.000、15.333和12.333。仿野生金釵石斛內(nèi)生細菌主要包括變形菌門、厚壁菌門和藍細菌門，變形菌門和藍細菌門為主要類群，根、莖和葉內(nèi)生細菌分屬于1086、1387和1075個屬，根部優(yōu)勢屬為假單胞桿菌屬（Pseudomonas），莖部和葉部優(yōu)勢屬均為埃希氏-志賀氏菌（Escherichia-Shigella）。香農(nóng)指數(shù)分別為2.794、1.828和2.810；辛普森指數(shù)分別為0.637、0.425和0.507；chao1指

4、數(shù)為737.411、385.812和959.738。
　　金釵石斛根際土壤細菌主要包括藍細菌門和變形菌門，1918個屬，藍細菌門為主要類群，優(yōu)勢屬為芽孢桿菌屬（Bacillus）。香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)分別為7.296和0.925，chao1指數(shù)為1973.580。
　　細菌多樣性大小為根際土壤>仿野生金釵石斛>種子>組培苗。
　　2.金釵石斛種子內(nèi)生真菌主要包括子囊菌門和擔子菌門，23個屬，子囊菌門為主要類群，德巴利酵

5、母屬（Debaryomyces）為優(yōu)勢屬。香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)分別為0.168和0.036，chao1指數(shù)為29.5。組培苗內(nèi)生真菌主要包括子囊菌門、擔子菌門和接合菌門，擔子菌門和接合菌門為主要類群。根、莖和葉內(nèi)生真菌分屬于28、16和22個屬，根部優(yōu)勢屬為絲衣霉屬（Byssochlamys），莖部優(yōu)勢屬為被孢霉屬（Mortierella），葉部優(yōu)勢屬為錐蓋傘屬（Conocybe）和德巴利酵母屬。香農(nóng)指數(shù)分別為0.090、0.088和0

6、.094，辛普森指數(shù)分別為0.015、0.016和0.017，chao1指數(shù)分別為28.750、18.000、22.333。仿野生金釵石斛內(nèi)生真菌主要包括擔子菌門、子囊菌門和厚壁菌門，擔子菌門和子囊菌門為主要類群。根、莖和葉內(nèi)生真菌分屬于377、248和274個屬，根部優(yōu)勢屬為輻孢屬（Dactylaria），莖部優(yōu)勢屬為熱子囊菌屬（Thermoascus），葉部優(yōu)勢屬為Neofusicoccum。香農(nóng)指數(shù)分別為0.671、0.157和0

7、.695；辛普森指數(shù)分別為0.173、0.026和0.179；chao1指數(shù)為912.145、94.911和183.944。
　　金釵石斛根際土壤真菌主要包括擔子菌門和子囊菌門，862個屬，擔子菌門為主要類群，優(yōu)勢屬為Rickenella。香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)分別為4.531和0.850，chao1指數(shù)為858.330。
　　真菌多樣性大小為根際土壤>仿野生金釵石斛>種子>組培苗。
　　3.金釵石斛根、莖、葉的石斛堿含

8、量在1.502~8.093 mg/g之間。從11月到次年9月，石斛堿的含量總體呈現(xiàn)先降低后升高再降低。根部和莖部石斛堿含量5月達到最高，9月最低，石斛堿含量具顯著性差異（P<0.05）。葉部石斛堿含量11月達到最高，7月最低，且3月、5月、7月分別與11月間均具有顯著性差異（P<0.05）。
　　4.對金釵石斛內(nèi)生菌結(jié)構(gòu)組成和石斛堿含量進行相關(guān)性和主成分分析，結(jié)果表明：
　　根部內(nèi)生細菌unidentified_Chloro

9、plast、Duganella和內(nèi)生真菌Dactylaria、Luellia與石斛堿含量為正相關(guān)，內(nèi)生細菌Geothermobacter、Pantoea和內(nèi)生真菌Rickenella與石斛堿含量為負相關(guān)。
　　莖部內(nèi)生細菌Paenibacillus和Burkholderia與石斛堿含量為正相關(guān)，內(nèi)生細菌Acinetobacter和Curvibacter以及內(nèi)生真菌Dactylaria、Cyphellophora、Candida和O