IL-6聯(lián)合G-CSF通過調(diào)控中性粒細(xì)胞的脫顆粒功能誘導(dǎo)其產(chǎn)生促瘤活性.pdf

1、目的:探討正常以及荷瘤小鼠骨髓中性粒細(xì)胞對腫瘤生長的影響,以及造成這種影響的調(diào)控因素。
　　方法:(1)用密度梯度離心的方法分離小鼠骨髓中的中性粒細(xì)胞,建立腫瘤細(xì)胞與PMN混合接種動物模型,觀察正常組骨髓PMN和荷瘤鼠骨髓PMN對腫瘤生長的影響;(2)構(gòu)建IL-6、G-CSF以及IL-6和G-CSF受體的真核表達(dá)載體,觀察在腫瘤細(xì)胞與PMN混合接種動物模型中,在不荷瘤的情況下表達(dá)這兩種細(xì)胞因子以及在荷瘤情況下阻斷這兩種細(xì)胞因子時P

2、MN對腫瘤生長的影響;(3)用肌肉部位轉(zhuǎn)染表達(dá)趨化因子真核表達(dá)載體的方法,建立體內(nèi)趨化PMN至腫瘤部位模型,觀察不同處理組PMN對腫瘤生長的影響;(4)在小鼠腹腔轉(zhuǎn)染表達(dá)趨化因子,將PMN募集到腹腔,Percoll分離腹腔PMN,獲得完成趨化過程但尚未進(jìn)入腫瘤微環(huán)境與之發(fā)生反應(yīng)的PMN,與腫瘤細(xì)胞混合接種,觀察正常小鼠、荷瘤小鼠以及不荷瘤但在肌肉局部表達(dá)IL-6和G-CSF的小鼠骨髓細(xì)胞對腫瘤生長的影響。
　　結(jié)果:(1)正常小鼠

3、骨髓PMN抑制腫瘤生長,而荷瘤小鼠骨髓PMN促進(jìn)腫瘤生長;(2)IL-6聯(lián)合G-CSF能夠改變小鼠骨髓PMN的抑瘤作用,使其具有促進(jìn)腫瘤生長的作用,在荷瘤小鼠中同時阻斷IL-6和G-CSF的表達(dá)可以消除荷瘤小鼠骨髓PMN的促進(jìn)腫瘤生長作用;(3)這種改變不受體內(nèi)趨化過程的影響,在PMN進(jìn)入腫瘤微環(huán)境之前得以保持;(4)趨化至腹腔的荷瘤小鼠PMN保持了這種促瘤功能,局部轉(zhuǎn)染表達(dá)了IL-6和G-CSF真核表達(dá)載體的小鼠腹腔PMN同樣也能促進(jìn)