葉酸靶向載順鉑磁性納米藥物的制備及安全性評價.pdf

1、惡性腫瘤是我國最常見疾病之一和最主要死因之一。目前，各種治療手段都有各自的局限性。
　　 納米顆粒(nanoparticles，NP)因其極小的粒徑，高的比表面積及表面活性等特殊性質(zhì)而受到廣泛的關(guān)注，以其為基礎構(gòu)建的納米藥物載體(drugcarrier)則具有能有效逃逸體內(nèi)吞噬系統(tǒng)，載藥量大等特點。分子靶向治療(moleculartargetedtherapy)是在納米藥物載體的表面連接某種物質(zhì)，如單克隆抗體、靶向配體等，使其能

2、與腫瘤細胞表面高表達甚至是唯一表達的抗原或者受體特異結(jié)合，介導藥物進入腫瘤細胞起到相對特異的殺傷作用，從而既避免了藥物在體內(nèi)的無序分布，也使腫瘤局部的藥物濃度明顯增大。許多惡性腫瘤的表面都高表達葉酸受體(folatereceptor，F(xiàn)R)，而正常組織則幾乎不表達，葉酸(FolicAcid，F(xiàn)A)已被用作靶向配體，以介導葉酸受體高表達的腫瘤靶向治療。靶向納米抗癌藥物能否應用于臨床，相對較小的毒性是最基本的要求。據(jù)此，本論文設計實施了下列

3、兩方面的研究：
　　 第一部分，采用共沉淀法(coprecipitation method)制備了Fe3O4磁性納米顆粒(magnetic nanoparticles，MNPs)；采用價格低廉，生物相容性好的海藻酸鈉(sodium alginate，SA)，通過高碘酸鈉氧化生成醛基化海藻酸鈉(aldehyde sodium alginate，ASA)后對MNPs進行表面修飾，獲得磁性納米藥物載體—醛基化海藻酸鈉表面修飾的磁性納米

4、顆粒(ASA modified magnetic nanoparticles，ASA-MNPs)。通過化學方法將葉酸和廣譜抗腫瘤藥物順鉑(cis-diamminodichloride platinum，CDDP)與醛基化海藻酸鈉表面修飾的磁性納米顆粒相連接，成功制備了一種葉酸分子靶向載順鉑醛基化海藻酸鈉表面修飾的磁性納米顆粒(CDDP loaded folate-linked ASA modified magnetic nanopart

5、icles，CDDP-FA-ASAMNPs)，并對其物現(xiàn)化學性質(zhì)及載藥性能進行了的表征，結(jié)果顯示磁核粒徑為8.116±0.24nm，流體力學粒徑為66.5±1.5nm，Zeta電位為-44.22±1.22mv，最大飽和磁化強度為56.2emu/g，醛基化海藻酸鈉的氧化程度為21.78±0.98％，順鉑的包封率(drug encapsulation efficiency，DEE)為49.05±1.58％，載藥量(drug loading

6、efficiency，DLE)為14.31±0.49％，紫外光譜顯示葉酸成功的與ASA-MNPs相連接。
　　 第二部分，對葉酸分子靶向載順鉑醛基化海藻酸鈉表面修飾的磁性納米顆粒進行安全性評價(safety evaluation)。通過CDDP-FA-ASAMNPs單次尾靜脈給藥的大鼠急性毒性試驗(acute toxicity)，計算得出了CDDP-FA-ASAMNPs的半數(shù)致死量(median lethal dose，LD50

7、)為12.832mg/kg。利用亞慢性毒性試驗(subchronic toxicity)觀察CDDP-FA-ASAMNPs重復給藥后對大鼠全身各系統(tǒng)的毒性效應。100只SD大鼠，雌雄各半，隨機分為5組，高劑量(1.3mg/kg)；CDDP-FA-ASAMNPs組、中劑量(0.6mg/kg)CDDP-FA-ASAMNPs組、低劑量(0.2mg/kg)CDDP-FA-ASAMNPs組、FA-ASAMNPs組及雙蒸水對照組。結(jié)果顯示，高劑量組

8、大鼠出現(xiàn)了明顯的毒性反應，攝食減少、體重減輕，血常規(guī)檢查顯示網(wǎng)織紅細胞計數(shù)(雌：111.67±27.87×109/L；雄：165.00±144.19×109/L)較空白對照組(雌：246.67±37.24×109/L；雄：256.67±44.57×109/L)明顯降低(P＜0.05)，提示骨髓抑制。生化檢查及組織病理學提示肝功能、腎功能損傷。中劑量組大鼠出現(xiàn)輕微毒性反應，包括攝食減少、體重減輕；低劑量組、FA-ASAMNPs組及空白對照