人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷模型的影響.pdf

1、背景：急性肺損傷（actuelunginjury，ALI）和急性呼吸窘迫綜合癥（acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS）是臨床常見危重癥，目前尚無切實(shí)有效的治療方法。ALI/ARDS發(fā)生和進(jìn)展的根本原因是全身炎癥反應(yīng)及炎癥損傷，如何在早期有效逆轉(zhuǎn)炎癥反應(yīng)進(jìn)行，是預(yù)防和治療ALI/ARDS的必要措施。人類臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（umbilicalcord-derivedmesenchymalstemcells

2、，UC-MSCs)具有自我更新及多向分化能力，并且具有免疫調(diào)節(jié)能力，是MSCs來源的理想選擇。研究表明MSCs移植對(duì)ALI模型有保護(hù)作用，這些研究為尋找有效的ALI/ARDS治療方法提供了新的思路。
　　目的：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定；建立內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷模型；探討臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)內(nèi)毒素性大鼠急性肺損傷模型的保護(hù)作用。
　　方法：
　　1.UC-MSCs分離、培養(yǎng)及鑒定：UC-MSCs分離采用

3、酶消化法，通過表面標(biāo)志物測(cè)定及多向分化能力測(cè)定對(duì)UC-MSC進(jìn)行鑒定。
　　2.ALI模型建立：將大鼠隨機(jī)分為3組，急性肺損傷組和干細(xì)胞移植組采用經(jīng)氣管內(nèi)滴注內(nèi)毒素建立急性肺損傷模型。
　　3.UC-MSCs移植及治療效果評(píng)價(jià)：造模1h后，干細(xì)胞移植組經(jīng)氣管內(nèi)滴注UC-MSCs懸液（1×106），正常對(duì)照組和急性肺損傷組同法予以等量生理鹽水。各組在臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及生理鹽水經(jīng)氣管滴注后24h和72h，觀察肺組織病理改變，檢測(cè)

4、病理組織評(píng)分、干濕重比、肺組織髓過氧化物酶活性及血漿IL-6、IL-10、TNF-α水平。
　　結(jié)果：
　　1.從臍帶當(dāng)中分離培養(yǎng)的UC-MSCs可貼壁生長(zhǎng)，呈均勻一致的長(zhǎng)梭形；陽性表達(dá)基質(zhì)細(xì)胞及干細(xì)胞標(biāo)記CD44、CD29、CD105，極低表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記CD34；經(jīng)誘導(dǎo)可分化形成脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞。
　　2.大鼠經(jīng)LPS誘導(dǎo)造模后，急性肺損傷組病理片可見肺泡間隔明顯增寬，肺泡內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、紅細(xì)胞漏出，并可見廣

5、泛的透明膜形成；病理損傷評(píng)分、肺組織MPO活性及W/D較正常對(duì)照組明顯增高。
　　3.UC-MSCs移植入大鼠ALI模型后，病理學(xué)分析表明可見肺泡壁大部分保持完整，增厚的肺泡間隔明顯變薄，肺組織內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及紅細(xì)胞漏出程度明顯減輕，肺泡腔內(nèi)透明膜消失；病理損傷評(píng)分、肺組織MPO活性及W/D均較急性肺損傷組明顯降低；血清細(xì)胞因子TNF-α及IL-6降低、IL-10明顯升高。
　　結(jié)論：
　　1.UC-MSCs對(duì)內(nèi)毒素誘