大腸癌患者圍手術(shù)期外周血T細(xì)胞亞群變化及功能研究.pdf

1、本文分兩部分研究了大腸癌患者圍手術(shù)期外周血T細(xì)胞亞群變化及功能。 第一部分大腸癌患者外周血T細(xì)胞亞群的變化及功能研究。 研究目的：檢測(cè)大腸癌患者外周血T細(xì)胞亞群變化及功能狀態(tài)，探討其在大腸癌中的免疫發(fā)病機(jī)制及影響因素。 研究方法：蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院2005年11月至2006年7月收住普外科手術(shù)的35例大腸癌患者，與13例同期蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院門診健康體檢者對(duì)照。比較外周血CD3<'+>、CD4<'+>、CD8

2、<'+>、CD4<'+>CD28<'+>、CD8<'+>CD28<'+>、CD4<'+>CD25<'+>、CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞亞群及CD4/CD8比例變化。收集相關(guān)臨床資料，分析大腸癌患者T細(xì)胞變化的影響因素。 研究結(jié)果：大腸癌患者外周靜脈血淋巴細(xì)胞總數(shù)和比例與健康人無區(qū)別(P>0.05)。T細(xì)胞亞群分析CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞百分比較正常對(duì)照組減少(P<0.05)，而CD3<'+>CD56<'+>T

3、細(xì)胞百分比較正常對(duì)照組升高(P<0.05)，CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>、CD8<'+>CD28<'+>、CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞和CD4/CD8比值無變化。年齡≤60歲的大腸癌患者較>60歲的患者CD3<'+>T細(xì)胞顯著減少(P<0.05)，CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞有減少趨勢(shì)，但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.070)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者較無轉(zhuǎn)移的患者CD8<'+>、CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)

4、胞顯著下降(P<0.05)，CD3<'+>、CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞有減少趨勢(shì)，未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.066，0.069)；惡性腫瘤中度分化的患者較分化低和高的患者CD3<'+>T細(xì)胞下降趨勢(shì)(P=0.073)；大腸癌患者隨著腫瘤浸潤(rùn)深度的加重CD8<'+>、CD8<'+>CD28<'+>、CD3<'+>CD56<'+>T逐漸細(xì)胞減少(P<0.05)；Dukes分期越晚的患者CD3<'+>T細(xì)胞減少越明顯(P<0.05)。

5、性別、腫塊位于直腸或結(jié)腸的部位、腫塊的大小對(duì)T細(xì)胞均未發(fā)現(xiàn)有影響。年齡與大腸癌患者的T細(xì)胞亞群相關(guān)性：大腸癌患者外周血CD3<'+>T細(xì)胞隨年齡增大而減少，外周血CD3<'+>T細(xì)胞對(duì)年齡的回歸方程為y=79.17-0.29x，r=0.302，P=0.093：大腸癌患者外周血CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞年齡增大而減少，外周血CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞對(duì)年齡的回歸方程為y=42.97-0.33x，r=0.370，P=0.

6、031。T細(xì)胞亞群間的相關(guān)性分析顯示CD3<'+>T細(xì)胞與CD4<'+>、CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞有直線回歸關(guān)系(回歸方程分別為y=20.48+0.28x,y=-8.70+0.58x；r=0.373，0.553；P=0.036，0.001)：CD4<'+>T細(xì)胞與CD8<'+>、CD4<'+>CD28<'+>、CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞及CD4/CD8間有直線回歸關(guān)系(回歸方程分別為y=47.20-0.36x，y=

7、2.72+0.56x，y=0.79+0.11x，y=-0.59+0.05x；r=0.366，0.466，0.362，0.797：P=0.033，0.0001，0.006，0.036)；CD8<'+>T細(xì)胞與CD4/CD8和CD8<'+>CD28<'+>、CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞間有直線回歸關(guān)系(回歸方程分別為)y=2.81-0.05x，r=-0.51+0.14x，y=-2.53+0.43x；r=0.755，0.386，0.3

8、46；P=0.0001，0.024，0.057)；CD4/CD8與CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞間存在直線回歸關(guān)系(回歸方程為)，y=-0.12+2.75x；r=0.534；P=0.001)：CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞與CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)胞間有直線回歸關(guān)系(回歸方程為y=0.85+0.14x：r=0.485；P=0.004)。 研究結(jié)論：1．大腸癌患者T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)處于抑制狀態(tài)大腸癌患

9、者T細(xì)胞亞群介導(dǎo)的免疫抑制狀態(tài)與患者的年齡，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)深度、Dukes分期等密切相關(guān)。具體表現(xiàn)為有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度低、局部浸潤(rùn)達(dá)漿膜和腸外的患者T細(xì)胞免疫功能下降明顯，Dukes分期晚的患者T細(xì)胞總數(shù)下降明顯。2．大腸癌患者的T細(xì)胞各亞群間相互影響，CD4<'+>、CD4<'+>CD28<'+>、CD8<'+>CD28<'+>、CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞是活化T細(xì)胞；CD8<'+>T細(xì)胞、CD4<

10、'+>CD25<'+>抑制性細(xì)胞；CD4/CD8比值升高反應(yīng)免疫活化。 第二部分大腸癌患者圍手術(shù)期外周血T細(xì)胞亞群變化及影響因素研究。 研究目的：檢測(cè)大腸癌患者手術(shù)后1周至1月T細(xì)胞亞群變化及功能狀態(tài)，探討大腸癌術(shù)后免疫變化的影響因素。 研究方法：對(duì)第一部分35例大腸癌患者中的30例術(shù)后1周再次采血檢測(cè)，另15例非配對(duì)的患者為手術(shù)后1月采血檢測(cè)。收集相關(guān)臨床資料，分析大腸癌患者術(shù)后1周T細(xì)胞免疫功能變化的影響因素

11、。 研究結(jié)果：大腸癌患者手術(shù)后1周淋巴細(xì)胞總數(shù)和比例均較健康人和術(shù)前顯著降低(P<0.05)；手術(shù)前、手術(shù)后1月患者的淋巴細(xì)胞總數(shù)和比例較健康人均無差異。手術(shù)后1周CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞較術(shù)前明顯增多(P=-0.029)，近正常對(duì)照水平，至術(shù)后1月又降低近術(shù)前水平(P<0.05)；CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)胞術(shù)后1周較術(shù)前無明顯變化，但較正常對(duì)照有降低趨勢(shì)(P=0.079)，術(shù)后1月又恢復(fù)；CD4<'+>C

12、D25<'+>T細(xì)胞術(shù)后1周較術(shù)前升高(P=0.024)，明顯高于正常水平，術(shù)后1月繼續(xù)升高；CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞術(shù)后1周較術(shù)前無變化，仍高于正常人，術(shù)后1月仍持續(xù)升高(P<0.05)。CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>T細(xì)胞和CD4/CD8無變化(P<0.05)。女性大腸癌患者術(shù)后CD3<'+>、CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞較男性患者更高傾向(P=0.101，0.068)；年齡≤60歲的患者較年齡>

13、60歲患者術(shù)后CD3<'+>T細(xì)胞更高(P=0.061)；結(jié)腸癌患者的CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞水平較直腸癌術(shù)后增高更明顯(P=0.035)：術(shù)中至術(shù)后1周內(nèi)輸血的患者較未輸血的患者CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞水平低(P=0.052)；手術(shù)后曾使用糖皮質(zhì)激素地塞米松的患者CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)胞水平降低，而未使用的則升高，兩者有顯著差異(P=0.015)，CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞都升高，但使用地

14、塞米松的患者CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞升高更明顯(P=0.008)；有腹腔局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的術(shù)后CD3<'+>T細(xì)胞低(P=0.008)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者術(shù)后CD8<'+>T細(xì)胞降低、CD4/CD8比值升高，而無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者術(shù)后CD8<'+>T細(xì)胞升高、CD4/CD8比值降低(P=0.012，0.019)；腫瘤細(xì)胞分化程度高的患者較分化程度低的患者術(shù)后CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞有上升趨勢(shì)(P=

15、0.066)；腫瘤局部浸潤(rùn)限于肌層以下者較浸潤(rùn)超過肌層者術(shù)后CD8<'+>T細(xì)胞升高明顯(P=0.022)，浸潤(rùn)限于黏膜及以下者術(shù)后CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞降低，而達(dá)肌層和超過肌層的患者術(shù)后CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞升高，浸潤(rùn)深度淺的患者CD3<'+>CD56<'+>T細(xì)胞水平更高(P=0.012)；Dukes分期C、D期患者術(shù)后CD3<'+>、CD8<'+>T細(xì)胞升高更明顯(P=0.022，0.037)，C、D期

16、患者較A、B期患者CD4/CD8比值、CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞有升高更明顯趨勢(shì)(P=0.097，0.098)；但T細(xì)胞亞群整體水平仍較A、B期低。 結(jié)論： 1．手術(shù)后1周至1月大腸癌患者的CD4<'+>CD28<'+>、CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫有波動(dòng)，CD4<'+>CD28<'+>T細(xì)胞先活化后抑制，CD8<'+>CD28<'+>T細(xì)胞先抑制后恢復(fù)，而Treg細(xì)胞、NKT細(xì)胞術(shù)后1