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1、 本研究建立LC/LC-MS方法,分別對(duì)多藥耐藥細(xì)胞系K562/ADM和敏感細(xì)胞系K562蛋白質(zhì)組進(jìn)行分離與鑒定,通過(guò)分析2個(gè)細(xì)胞系中蛋白質(zhì)種類(lèi)及數(shù)量的改變,篩選可能產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞MDR的相關(guān)蛋白質(zhì),以期尋求具有潛在臨床應(yīng)用前景的腫瘤多藥耐藥的鑒定方法,并指導(dǎo)臨床合理選擇抗腫瘤藥物和化療方案,提高白血病的治療療效。 利用二維高效液相色譜(HPLC)與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),分離與鑒定K562/ADM多藥耐藥細(xì)胞系和K562敏感細(xì)胞系蛋白
2、質(zhì)樣品。HPLC分離模式中一維分離模式采用離子交換色譜(IEC),第二維液相分離系統(tǒng)采用反相色譜(RPLC)。結(jié)論采用二維高效液相色譜和電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),建立IEC-RPLC-MS/MS技術(shù)平臺(tái),可較好地實(shí)現(xiàn)K562/ADM和K562兩個(gè)細(xì)胞系蛋白質(zhì)組的分離與鑒定。與K562敏感細(xì)胞系相比,K562/ADM耐藥細(xì)胞系有明顯的差異性蛋白質(zhì)表達(dá),推測(cè)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥性與細(xì)胞內(nèi)多種差異蛋白相關(guān)。其中找到20種有明顯差異的蛋白,有待于在今
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