硼替佐咪與阿糖胞苷對K562-ADM作用的研究.pdf

1、目的：
　　 本研究探討硼替佐米(bortezomib，Bor)單獨或聯(lián)合阿糖胞苷(Arabinosylcytonsin，Ara-c)應(yīng)用于白血病耐藥細胞株K562/ADM，對其增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用。
　　 方法：
　　 以不同濃度Bor、Ara-c處理K562/ADM細胞48小時，MTT法分別測定Bor、Ara-c兩藥對K562/ADM細胞作用48h的IC50值，將兩藥以48h的IC50值的濃度單獨和聯(lián)合作用

2、于細胞48h后，使用MTT比色法檢測細胞增殖抑制活性，流式細胞術(shù)檢測細胞的凋亡，及用RT-PCR測MDR基因的表達，并分析硼替佐米是否具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用。
　　 結(jié)果：
　　 1.Bor的濃度在0.5 nmol/L對K562/ADM細胞作用48時，未見明顯的增殖抑制作用，其中5 nmoL/L劑量處理12小時后開始有細胞的凋亡發(fā)生，而5-50nmol/L濃度的Bor則能有效的抑制K562/ADM細胞增殖并引起其凋

3、亡，而隨著延長Bor作用時間或增加Bor劑量可使細胞凋亡率明顯增加。
　　 2.1.0μmol/L Ara-c作用于K562/ADM細胞48h時，未見明顯的增殖抑制作用。當(dāng)Ara-c的濃度增高至5μmol/L其抑制作用開始加強，并隨著Ara-c劑量加大或延長Ara-c作用時間，可以使細胞凋亡率加強。
　　 3.MTT法測得Ara-c對K562/ADM細胞在48h的IC50值為5μmol/L，Bor對K562/ADM細胞在

4、48h的IC50值為20 nmoL/L；而聯(lián)合用藥組細胞的生長抑制率和凋亡率均高于兩藥分別單獨處理組(P<0.05)，且在各聯(lián)合用藥組中，C組(Ara-C、Bor同時給藥組)細胞生長抑制率和凋亡率分別為(69.70±4.16％)和(35.97±3.72％)，均高于先予Ara-C預(yù)處理后再加入Bor的A組(68.87±3.63％)和(34.43±2.64％)和先加入Bor預(yù)處理6h后序貫Ara-C的B組(62.77±2.69％)和(33.

5、03±4.48％)；聯(lián)合用藥A組生長抑制率稍高于聯(lián)合用藥B組，但將各聯(lián)合組之間數(shù)值進行比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4.半定量RT-PCR測得用Ara-C、Bor單藥組后MDR的表達分別為84.7±9.4％和85.1±8.4％，在Ara-c單藥組與Bor單藥組組間的MDR的表達無明顯差異；將聯(lián)合組分別與Ara-c、Bor單藥組進行比較，聯(lián)合組的MDR的表達顯著低于兩單藥組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而在各

6、聯(lián)合用藥組中，以C組(Ara-C、Bor同時給藥組)MDR的表達最低，值為41.5±1.8％，均低于先予Ara-C預(yù)處理后再加入Bor的A組(47.3±2.0％)和先加入Bor預(yù)處理6h后序貫Ara-C的B組(53.0±1.6％)，但將各聯(lián)合組之間數(shù)值進行比較，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.Bor的濃度在0-5nmol/L對K562/ADM細胞的增殖抑制不明顯，當(dāng)藥物濃度>5nmol/L時對K5