谷甾烷醇的分析、制備及降膽固醇功能研究.pdf

1、植物甾醇廣泛存在于真核細(xì)胞中，它是構(gòu)成動植物細(xì)胞的基本成份，在動植物中廣泛存在。在自然界中，甾醇主要以豆甾醇、谷甾醇、菜油甾醇及飽和甾醇(即甾烷醇)等形式存在。 用于甾醇、甾烷醇類化合物分析的方法主要有薄層色譜法、可見光比色法、氣相色譜法、紫外檢測高效液相色譜法等。本課題合成了熒光衍生化試劑2-(9-咔唑)乙酰氯，并首次將其用于柱前衍生熒光檢測甾醇、甾烷醇等仲醇化合物，通過工藝優(yōu)化獲得了理想的衍生化條件；進行了柱前衍生高效液相熒

2、光分析方法的研究，獲得了相應(yīng)的工作曲線、線性范圍、精密度和檢測限，其檢測限與高效液相紫外分析法作對比，靈敏度明顯高于后者，谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇檢測靈敏度分別是紫外檢測高效液相色譜的31、40和33倍，同時該方法克服了谷甾烷醇分子中無發(fā)色基團而使紫外無法檢測的不足，谷甾烷醇檢測限則為23.2nmol/L，本課題還用該方法測定了大鼠血清中谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和谷甾烷醇的濃度，探索了高效液相測定谷甾烷醇的新方法。 甾烷醇在自然

3、界中數(shù)量極少，主要通過催化氫化將甾醇中的不飽和雙鍵還原成飽和鍵，植物甾醇通過氫化轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的甾烷醇，目前國外谷甾烷醇(sitostanol)是以谷甾醇為原料在一定壓力下催化氫化制得，國內(nèi)尚無谷甾烷醇生產(chǎn)。本課題以國內(nèi)易得的豆甾醇(stigmasterol)為原料，通過常壓催化氫化，制得較高純度的谷甾烷醇，并確定了最佳工藝條件，從而避免了使用價格昂貴且國內(nèi)供應(yīng)極少的谷甾醇為原料。通過單因素影響實驗，得出豆甾醇催化氫化制備谷甾烷醇的工藝條件

4、為：n(異丙醇)：n(豆甾醇)=80:1， Pd/C質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％(以Pd計)，反應(yīng)溫度為82℃，反應(yīng)時間為8h，谷甾烷醇轉(zhuǎn)化率約為94％；在單因素影響實驗基礎(chǔ)上，進行了正交實驗，在反應(yīng)溫度82℃、反應(yīng)時間8h、Pd/C催化劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.12％(以Pd計)、異丙醇:豆甾醇=80:1(摩爾比)的反應(yīng)條件下，谷甾烷醇轉(zhuǎn)化率可達95.71％；Pd/C催化劑對豆甾醇?xì)浠€原生成谷甾烷醇具有較高的催化活性，此方法工藝簡單，操作方便，反應(yīng)在常

5、壓下進行，選用豆甾醇為原料，國內(nèi)易得、價格較低，使產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)簡單易行。 對反應(yīng)中間產(chǎn)物進行了分析，揭示了豆甾醇催化氫化制備谷甾烷醇的反應(yīng)機理。 反應(yīng)動力學(xué)研究表明，谷甾烷醇的制備反應(yīng)是二步連串反應(yīng)，且二步均為一級反應(yīng)，其速率常數(shù)分別為k<,1>=0.5402 mol/L·h、k<,2>=0.7460 mol/L·h，反應(yīng)動力學(xué)方程為：z=a[1-3.625 e<'-0.5402t>+2.625e<'-0.7460t

6、>]谷甾烷醇為環(huán)戊烷氫化菲類化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，對合成所得的谷甾烷醇進行了結(jié)構(gòu)確證。測定了自制谷甾烷醇樣品的熔點、比旋度、高效液相色譜、紅外光譜、元素分析、質(zhì)譜、核磁共振譜(<'1>H-NMR、<'13>C-NMR、DEPT、H-H COSY、HMQC、GHMBC)，其中自制谷甾烷醇樣品的熔點、比旋度、高效液相色譜、紅外光譜與對照品測定值作了對比，確證了自制谷甾烷醇樣品的化學(xué)結(jié)構(gòu)。 研究發(fā)現(xiàn)，谷甾烷醇、甾醇對小鼠高血脂和動脈

7、粥樣硬化有明顯的預(yù)防和治療作用。與模型組相比，谷甾烷醇、甾醇預(yù)防組小鼠血清總膽固醇水平分別下降31.83％、27.88％，小鼠血清低密度脂蛋白膽固醇水平分別下降42.39％、34.78％，動脈硬化指數(shù)分別減小39.27％、31.47％，表明谷甾烷醇和甾醇能明顯阻止動脈粥樣硬化的危險因素低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇水平的上升，降低動脈硬化指數(shù)；谷甾烷醇、甾醇治療組與模型組相比，小鼠血清總膽固醇水平分別下降35.25％、30.76％，小鼠血