2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:食管胃底靜脈曲張是門脈高壓癥的嚴(yán)重并發(fā)癥,一旦破裂可造成大出血,危及患者生命。普萘洛爾(心得安)是目前預(yù)防肝硬化靜脈曲張破裂出血的最常用藥物,需要長期、足量給藥。但肝硬化病人長期服用普萘洛爾是否會對患者肝星狀細胞活化及肝纖維化產(chǎn)生影響,目前尚不得而知。而對肝硬化有無促進或抑制作用是給肝硬化患者長期服藥時需要考慮到的問題。
   本研究以肝纖維化的關(guān)鍵細胞一肝星狀細胞為研究對象,采用細胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù),觀察β-受體阻滯

2、劑普萘洛爾對人肝星狀細胞(Hepatic StellateColI,HSC)的增殖、凋亡以及致肝纖維化作用的影響,目的是探討普萘洛爾對肝星狀細胞形態(tài)和功能的影響,從而闡明肝硬化患者長期服用普萘洛爾對肝纖維化有無潛在的促進或抑制作用。
   方法:采用HSC-LX2肝星狀細胞系作為活化肝星狀細胞的研究模型,在培養(yǎng)的肝星狀細胞中分別加入不同濃度的鹽酸普萘洛爾(10μmol·L-1、25μmol·L-1、50μmol·L-1、100μ

3、mol·L-1),于24小時收集細胞,觀察HSC的生長情況。采用水溶性四唑鹽-1(Water-Soluble Tetrazolium-1,WST-1)細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒檢測不同藥物濃度下肝星狀細胞的增殖情況,流式細胞儀(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)檢測細胞凋亡情況。提取細胞蛋白成分,用Western blotting法檢測α-平滑肌肌動蛋白(α-Smooth Muscle

4、Actin,α-SMA)表達水平。提取細胞培養(yǎng)液上清,用酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme LinkedImmunosorbent Assay,ELISA)法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforming GrowthFactor-β1,TGF-β1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)以及膠原Ⅰ、Ⅲ的表達水平。數(shù)值用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,不同組間結(jié)果的比較用單因素方差分析(One

5、-way ANOVA),兩個組之間的比較采用最小顯著差(the Least Significant Differenee,LSD)t檢驗,P<0.05為差異有顯著性。
   結(jié)果:采用WST-1試劑盒檢測HSC增殖情況,普萘洛爾可抑制HSC的增殖,且隨藥物濃度增高,其抑制作用逐漸增強,抑制率由35.51%逐漸上升至95.74%。FACS法檢測細胞凋亡,普萘洛爾可促進HSC的凋亡,且呈劑量依賴性,隨普萘洛爾濃度增加,HSC凋亡率逐

6、漸升高,各組依次為54.97±0.86%、57.17±1.15%、66.30±1.11%和81.96±1.72%,與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)差異。采用Western blotting法檢測HSC表達α-SMA.的水平,普萘洛爾處理組細胞α-SMA的表達水平(四組灰度比值依次為0.6771±0.0064、0.6899±0.0185、0.6271±0.0091和0.5951±0.0219)明顯低于正常對照組(0.7550±0.0157)和生理鹽

7、水組(0.7439±0.0165),具有顯著性差異,且與劑量具有相關(guān)性。采用ELISA法檢測細胞培養(yǎng)液中TGF-β1、MMP-2以及膠原Ⅰ、Ⅲ的表達水平,普萘洛爾可濃度依賴性地抑制HSC分泌TGF-β1、MMP-2以及膠原Ⅰ、Ⅱ的水平。
   結(jié)論:
   1.普萘洛爾可使HSC-LX2的活化、增殖受到明顯抑制,且呈濃度依賴性,其發(fā)揮作用可能是通過與β-AR結(jié)合實現(xiàn)的。
   2.普萘洛爾可使HSC-LX2的凋亡

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