金屬離子對(duì)內(nèi)氏放線菌尿素酶活性的影響.pdf

1、目前，齒科金屬和合金材料已廣泛的應(yīng)用于口腔修復(fù)等臨床治療中，其介入口腔環(huán)境后與口腔粘膜、牙齦組織、大量微生物直接接觸會(huì)發(fā)生金屬腐蝕導(dǎo)致金屬離子及其衍生物析出，另外合金材料與組織緊密接觸也容易造成金屬離子的積聚。有研究認(rèn)為，齒科合金的腐蝕導(dǎo)致金屬離子的釋放并引起相應(yīng)的金屬-蛋白、金屬-細(xì)胞反應(yīng)，是引起牙齦牙周組織炎癥的主要原因之一。 但從生態(tài)學(xué)角度看，口腔是一個(gè)多生態(tài)體系，其中微生態(tài)系與口腔疾病密切相關(guān)。正常情況下的口腔微生物系統(tǒng)

2、處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)體內(nèi)外環(huán)境發(fā)生持續(xù)變化，一些潛在微生物過(guò)度增殖將破壞這種平衡，導(dǎo)致口腔疾病發(fā)生。齲病和牙周病就是口腔微生態(tài)失衡的表現(xiàn)。影響口腔微生態(tài)的因素很多，其中碳水化合物和氮源化合物代謝所致的PH值是決定牙菌斑和牙周微生態(tài)平衡的重要因素，而尿素代謝是菌斑內(nèi)提供堿性物質(zhì)的主要途徑之一，尿素代謝產(chǎn)生的堿性物質(zhì)可中和細(xì)菌糖代謝產(chǎn)生的酸，提高了PH值，有利于細(xì)菌自身和其它耐酸性較差的微生物生長(zhǎng)，從而阻止菌斑生態(tài)向致齲菌群轉(zhuǎn)化，。另一方面

3、，齦下菌斑中尿素代謝產(chǎn)生的高PH值和高濃度氨被認(rèn)為與齦炎的發(fā)生以及牙周組織的破壞有關(guān)。此外，尿素代謝產(chǎn)物氨還可以與菌斑內(nèi)許多有機(jī)物結(jié)合生成氨基酸成為菌斑微生物的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源之一。因此，由尿素酶介導(dǎo)的尿素代謝在維持菌斑微生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性上起著十分重要的作用。尿素酶是尿素分解的必要條件，雖然它在細(xì)菌體內(nèi)合成，但它的活性表達(dá)要受到外界環(huán)境因素的影響，那么齒科合金析出的金屬離子是否會(huì)影響細(xì)菌尿素酶的活性呢?是否會(huì)通過(guò)影響細(xì)菌尿素酶的活性改變口腔微生

4、態(tài)環(huán)境從而影響其致病性呢? 齒科合金析出金屬離子具有選擇性，鎳鉻合金以析出鎳離子為主，銅離子和鋅離子則是貴金屬合金常見(jiàn)的析出離子。 內(nèi)氏放線菌是人類(lèi)口腔和齦上齦下菌斑中的常居菌，被認(rèn)為和早期根面齲、牙周病有關(guān)，內(nèi)氏放線菌是革蘭氏陽(yáng)性兼性厭養(yǎng)菌，具有合成尿素酶的能力，參與尿素代謝。 本實(shí)驗(yàn)以?xún)?nèi)氏放線菌為研究對(duì)象，體外觀察齒科合金析出離子對(duì)口腔微生物尿素代謝尿素酶活性的影響。 [研究目的]研究金屬離子對(duì)內(nèi)氏放

5、線菌尿素酶活性的影響。 [研究方法]用含不同濃度梯度的銅鋅鎳離子的BHI培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)內(nèi)氏放線菌WVU45型菌株、測(cè)定其尿素酶活性。 [研究結(jié)果]1。內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性隨著銅離子濃度(12.5～100μmol/L)的升高而降低。與對(duì)照組相比，當(dāng)銅離子濃度為12.5μmol/L時(shí)，內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性降低為(0.125±0.008)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重(P＜0.05)；當(dāng)銅離子濃度為100μmol/L時(shí)，

6、內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性為(0.0349±0.010)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重(P＜0.01)。 2.內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性隨著鋅離子(0～50μmol/L)濃度的升高有下降趨勢(shì)；當(dāng)鋅離子濃度為過(guò)100μmol/L時(shí)，尿素酶活性的降低與對(duì)照組相比有顯著性差別(P＜0.05)。 3.內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性隨著鎳離子濃度(12.5～100μmol/L)的升高而增強(qiáng)。當(dāng)鎳離子濃度為12.5μmol/L時(shí)，內(nèi)氏放線菌尿素酶

7、的活性從(0.188±0.013)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重升高為(0.511±0.012)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重(P＜0.05)；當(dāng)鎳離子濃度為50μmol/L時(shí)，內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性升高為(1.027±0.147)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重(P＜0.01)；當(dāng)鎳離子濃度為100μmol/L時(shí)，內(nèi)氏放線菌尿素酶的活性從升高為(3.791±0.100)ug產(chǎn)氨量/min/mg細(xì)菌濕重(P＜0.001)。