肥厚心肌縫隙連接蛋白43的下調(diào)及通心絡(luò)的干預(yù)作用.pdf

1、第一部分：通心絡(luò)對異丙腎上腺素誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大及Cx43mRNA表達(dá)的影響
　　目的：觀察通心絡(luò)超細(xì)干粉水提物對異丙腎上腺素（Isoproterenol, Iso）誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大的作用，并探討其對縫隙連接蛋白43(connexin43， Cx43)mRNA表達(dá)的影響。
　　方法：將培養(yǎng)的H9c2心肌細(xì)胞隨機(jī)分為對照組、TXL組、Iso組和Iso+TXL組，通心絡(luò)以通心絡(luò)超細(xì)干粉水提物的形式加入，用Iso

2、誘導(dǎo)72h后，采用相差顯微鏡測量細(xì)胞大小，BCA法測定細(xì)胞總蛋白濃度，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）測定Cx43mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：Iso刺激H9c2心肌細(xì)胞72小時后，Iso組細(xì)胞直徑增大，總蛋白濃度升高，明顯高于對照組（P<0.05）；通心絡(luò)對正常H9c2心肌細(xì)胞直徑，總蛋白濃度無明顯影響，但能抑制Iso誘導(dǎo)的細(xì)胞直徑增大及總蛋白濃度升高（P<0.05）。Iso組Cx43mRNA表達(dá)明顯減少，低于對照組（P<0.

3、05）；通心絡(luò)對正常H9c2心肌細(xì)胞Cx43mRNA表達(dá)無影響，但能夠抑制Iso誘導(dǎo)的Cx43 mRNA表達(dá)的下調(diào)（P<0.05）。
　　結(jié)論：通心絡(luò)可以抑制Iso誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大及Cx43mRNA表達(dá)的下調(diào)。
　　第二部分：通心絡(luò)改善肥厚心肌大鼠QT離散度及縫隙連接蛋白43的重構(gòu)
　　目的：觀察通心絡(luò)對壓力負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠QT離散度和縫隙連接蛋白43重構(gòu)的干預(yù)作用。
　　方法：將45只雄性SD大

4、鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（sham-operation, SO）15只，腹主動脈縮窄組（abdominal aorta constriction, AC）15只,腹主動脈縮窄+通心絡(luò)組（AT）15只。腹主動脈縮窄法建立心肌肥厚模型，經(jīng)通心絡(luò)治療12周后，應(yīng)用超聲心動圖測定心肌肥厚程度，心臟電生理記錄儀測定大鼠QT離散度，HE染色觀察左室組織病理形態(tài)變化，免疫組織化學(xué)法觀察左室心肌Cx43的表達(dá)及分布，RT-PCR測定左室心肌Cx43mRNA的

5、表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)超聲心動圖測量參數(shù)比較：與AT組和SO組比較，AC組 LVPWs、LVPWd、IVSs及IVSd均顯著增高（P<0.05）；AT組和SO組之間比較，測量參數(shù)無顯著差異。(2) QT離散度比較：與AT組和SO組比較，AC組明顯延長（P<0.05）；AT組和SO組間比較，QT離散度無顯著差異。(3)HE染色、心肌細(xì)胞橫徑（TDM）及左室相對質(zhì)量（LVW/BW）比較：與AT組和SO組比較，AC組心肌細(xì)胞明顯肥大、

6、排列紊亂，TDM及LVW/BW明顯增加（P<0.05）；AT組和SO組相比，心肌細(xì)胞無明顯肥大、排列規(guī)則，TDM及LVW/BW無明顯改變。(4)免疫組化：與AT組和SO組比較，AC組Cx43表達(dá)明顯減少（P<0.05），分布紊亂；AT組和SO組比較，Cx43表達(dá)及分布無顯著差異。(5)RT-PCR：與AT組和SO組比較，AC組Cx43mRNA表達(dá)明顯減少（P<0.05）；AT組和SO組比較，Cx43mRNA表達(dá)無顯著差異。
　　結(jié)