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文檔簡介
1、目的:建立糖尿病胃輕癱大鼠模型,采用免疫組織化學(xué)方法觀察和比較正常組和糖尿病組大鼠胃壁Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)和縫隙連接蛋白(connexin43)分布,探討糖尿病胃輕癱的發(fā)病機(jī)制。 方法:1.動(dòng)物分組及處理:20只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組和糖尿病組,后者一次性腹腔注射STZ(50mg/kg),隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為造模成功。自由飲水進(jìn)食飼養(yǎng)8周,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)兩組大鼠分別予酚紅溶液灌胃,30min后處死
2、大鼠,剖腹,結(jié)扎胃幽門和賁門,取出胃,采用酚紅法計(jì)算胃排空率,以胃液體排空延遲確認(rèn)為糖尿病胃輕癱造模成功。2.用免疫組織化學(xué)方法,觀察正常組和糖尿病組大鼠胃壁ICC和Connexin43的分布情況,進(jìn)行半定量分析和比較。 結(jié)果:注射STZ的糖尿病組大鼠出現(xiàn)明顯的血糖升高和體重減輕,與正常對照組比較有顯著差異(P<0.01)。與對照組比較,8周后糖尿病大鼠胃液體排空明顯延遲(P<0.01),確認(rèn)為糖尿病胃輕癱造模成功。免疫組化顯示
3、,對照組大鼠胃體、胃竇的環(huán)形和縱形肌層、肌間神經(jīng)叢中有密集的ICC分布。糖尿病組大鼠胃體和胃竇部肌層中ICC分布稀疏,數(shù)量明顯減少(p<0.01)。對照組抗Connexin43陽性表達(dá)顆粒密集分布在胃體和胃竇環(huán)形肌層中,陽性表達(dá)強(qiáng)弱與ICC分布具有一致性,而在縱形肌層和腸肌層區(qū)未見明顯陽性表達(dá),糖尿病組Connexin43陽性表達(dá)明顯減弱甚至消失(p<0.01)。 結(jié)論:腹腔注射STZ(50mg/kg)可以誘導(dǎo)糖尿病胃輕癱模型。
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