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文檔簡介
1、目的:
通過鑒定Rock2磷酸化位點來研究其對肝癌細胞生物學(xué)活性的影響,并明確Rock2在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用。
方法:
1.通過磷酸化位點預(yù)測軟件以及生物信息學(xué)分析Rock2結(jié)構(gòu),并設(shè)計可能發(fā)生磷酸化位點的磷酸化多肽。
2.分別對HepG2細胞和MHCC97H細胞進行UV照射,通過Western Blot分析Rock2可能發(fā)生磷酸化的位點。
3.應(yīng)用平板克隆形成實驗和細胞凋亡實驗,
2、觀察UV輻射誘導(dǎo)DNA損傷時, Rock2磷酸化位點對肝癌細胞生物學(xué)活性的影響。
結(jié)果:
1. Rock2可能發(fā)生磷酸化的位點有:(1) S442;(2) S771;(3) T814。
2. UV照射后,Rock2的T814位點發(fā)生磷酸化。
3. UV照射后,MT-Rock2組的克隆形成率比WT-Rock2組低。
4. UV照射后,MT-Rock2組的細胞凋亡率比WT-Rock2組高。<
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