內(nèi)源性雄激素、雄激素受體水平及雄激素受體CAG重復(fù)序列多態(tài)性與老年男性冠心病的相關(guān)性研究.pdf

1、冠心病的發(fā)病模式存在性別差異，其內(nèi)在機(jī)制至今仍不清楚。增齡和男性性別是冠心病最強(qiáng)的獨(dú)立危險因素。雄激素水平隨年齡增加而降低，老年男性常伴有遲發(fā)性性腺機(jī)能減退，對整體健康狀況有不良影響。已有資料顯示男性低睪酮水平與多種心血管危險因素有關(guān)，包括高血壓、血脂異常、肥胖、糖尿病及代謝綜合征等。而冠心病發(fā)病率隨著增齡而增加。探討內(nèi)源性雄激素水平的年齡變化趨勢與冠心病的相關(guān)性及潛在機(jī)制是近些年研究的熱點(diǎn)。現(xiàn)有大量證據(jù)表明雄激素不足促進(jìn)心血管病的發(fā)生

2、和發(fā)展。但由于缺乏大型流行病學(xué)和臨床對比研究，關(guān)于雄激素不足與心血管病之間的關(guān)系還沒有定論。雄激素的生理作用可以分為非基因組作用和由雄激素受體介導(dǎo)的基因組作用。目前已經(jīng)證實(shí)脈管系統(tǒng)的各種細(xì)胞成分中均有AR表達(dá)。從位于細(xì)胞核內(nèi)，屬于配體活化的轉(zhuǎn)錄因子。雄激素受體基因轉(zhuǎn)錄活性的細(xì)微調(diào)節(jié)由AR NH2-端多聚谷氨酰胺（Gln）n長度的變化決定，多聚谷氨酰胺片段的大小與受體的轉(zhuǎn)錄功能負(fù)相關(guān)。該片段是由AR基因外顯子-1的三核苷酸（cytosin

3、e，adenine，guanine，CAG）重復(fù)序列編碼。在正常人群中AR CAG重復(fù)數(shù)呈高度多態(tài)性。有研究顯示這種基因多態(tài)性對雄激素水平、雄激素受體表達(dá)水平及AR活性有調(diào)節(jié)作用。AR基因CAG重復(fù)序列多態(tài)性對雄激素受體轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)節(jié)，可能導(dǎo)致雄激素對這些靶細(xì)胞的效應(yīng)發(fā)生改變。在此基礎(chǔ)上，有學(xué)者推測CAG重復(fù)序列可能是男性動脈粥樣硬化的一種遺傳學(xué)標(biāo)志。鑒于我國已進(jìn)入人口老齡化社會，冠心病在老年人群的高發(fā)病率和高死亡率給社會醫(yī)療帶來沉重的

4、負(fù)擔(dān)，進(jìn)一步研究雄激素與男性冠心病的相關(guān)性及潛在機(jī)制十分必要，本研究擬在內(nèi)源性雄激素水平一雄激素受體一雄激素受體基因多態(tài)性三個層次加以探討，為冠心病的防治方法提供新的思路。
　　 目的：
　　 1 探討內(nèi)源性雄激素水平與老年男性冠心病的相關(guān)性；
　　 2 探討AR CAG重復(fù)序列多態(tài)性與老年男性冠心病的相關(guān)性及影響因素；
　　 3 初步推測內(nèi)源性雄激素參與老年男性冠心病發(fā)生的可能機(jī)制。
　　 研究

5、對象
　　 連續(xù)入選有冠狀動脈造影證據(jù)的老年男性（≥60歲）296例，年齡在60～86歲之間。冠心病組（至少有1支冠狀動脈存在≥50％的動脈粥樣硬化性狹窄病變）237例，平均年齡68.6±6.8歲；對照組（冠狀動脈造影陰性）59例，平均年齡66.2±6.48歲。排除前列腺癌、PSA異常升高（>4ng/ml）及正在使用睪酮或雌激素治療者。
　　 方法
　　 1 采空腹外周靜脈血，分離血清，分別檢測FT、TT、E：、

6、LH、FSH、SHBG及DHEA七種性激素水平。FT的檢測使用酶聯(lián)免疫法，其他6個指標(biāo)采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法進(jìn)行檢測。
　　 2 采空腹外周靜脈血，EDTA抗凝，經(jīng)溶血、分離得到白細(xì)胞，以間接免疫熒光標(biāo)記法標(biāo)記AR受體，流式細(xì)胞術(shù)檢測淋巴細(xì)胞的雄激素受體水平（以AR陽性率表示）。
　　 3 酚/氯仿核酸抽提法提取全血基因組DNA，采用熒光標(biāo)記引物進(jìn)行目的片段PCR擴(kuò)增，得到含有CAG重復(fù)序列多態(tài)性位點(diǎn)的特異性PCR產(chǎn)物。

7、所得產(chǎn)物進(jìn)行微衛(wèi)星掃描分析及STR分型，根據(jù)參照序列計算得到相應(yīng)標(biāo)本的CAG重復(fù)數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 1 與對照組比較，冠心病組FT、TT、SHBG、DHEA、AR陽性率水平降低，LH、FSH和E2水平升高，但均無統(tǒng)計學(xué)意義。冠心病組AR CAG重復(fù)數(shù)明顯低于對照組，短AR者[（CAG）n<22]所占比例明顯高于對照組。短AR組的FT水平明顯低于長AR組，其他六種性激素水平無明顯差異。
　　 2 單因素分析顯

8、示，F(xiàn)T與年齡、FSH水平負(fù)相關(guān)；TT與BMI、LH、FSH負(fù)相關(guān)；DEHA與年齡、LH、FSH負(fù)相關(guān)；SHBG與BMI負(fù)相關(guān)，與年齡、LH、FSH正相關(guān)；E2與BMI正相關(guān)，與FSH、LH負(fù)相關(guān)；AR陽性率與年齡負(fù)相關(guān)；CAG重復(fù)數(shù)與FT、TT、DHEA、SHBG、E2及AR陽性率均無明確相關(guān)性。
　　 3 分層分析顯示，冠心病合并肥胖+超重者TT和SHBG水平明顯低于體重正常者，冠心病合并高血壓病者SHBG水平明顯低于無高血

9、壓病者。冠心病合并糖尿病者與對照組無糖尿病者比較，TT、FT水平明顯減低；冠心病合并肥胖+超重者與對照組體重正常者比較，TT水平明顯減低。
　　 4 對可能影響FT水平的因素進(jìn)行多元線性回歸分析顯示：年齡、FSH、E2與FT水平負(fù)相關(guān)。對可能影響AR水平的因素進(jìn)行多元線性回歸分析顯示：年齡與AR陽性率負(fù)相關(guān)，而FT與之正相關(guān)。
　　 5 短AR組合并雙支病變者顯著多于長AR組（P<0.05）；短AR組存在單支、雙支及三支

10、以上血管病變時FT水平都低于長AR組，但未達(dá)統(tǒng)計學(xué)意義，僅雙支病變時FT水平降低接近統(tǒng)計學(xué)顯著性（P=0.05）。
　　 6 對冠心病的傳統(tǒng)危險因素、性激素水平、AR陽性率及AR CAG重復(fù)數(shù)分組[短AR組（CAG）n<22，長AR組（CAG）n≥22]的Logistic回歸分析顯示：年齡、短AR和FT與冠心病的發(fā)病危險有顯著相關(guān)性（OR=1.06，P=0.0297；OR=2.04，P=0.0263；OR=0.98，P=0.00

11、49）.但當(dāng)以AR CAG重復(fù)數(shù)數(shù)值替代按長短分組進(jìn)行分析時，CAG重復(fù)數(shù)與冠心病發(fā)病危險無相關(guān)性。短AR與冠心病的相關(guān)性不依賴對血清FT和外周血淋巴細(xì)胞AR表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。
　　 結(jié)論：
　　 1 隨著年齡增加，老年男性的FT、TT、DHEA、E2水平及外周血淋巴細(xì)胞AR表達(dá)水平下降，而SHBG水平升高。
　　 2 內(nèi)源性FT水平與冠心病負(fù)相關(guān)，是獨(dú)立的保護(hù)因素；而年齡和短AR與冠心病正相關(guān)，增加發(fā)病危險。外周