痤瘡的流行病學(xué)及與雄激素受體基因多態(tài)性的相關(guān)研究.pdf

1、本研究首先以整群隨機(jī)抽樣的方法對(duì)沈陽(yáng)市5所高校的在校大學(xué)生進(jìn)行了一次痤瘡的流行病學(xué)調(diào)查，擬從流行病學(xué)角度了解痤瘡的患病情況及其影響因素、探討遺傳在痤瘡發(fā)病中的作用。因?yàn)樵诓煌娜朔N中，雄激素受體基因的多態(tài)性具有不同的遺傳背景，我們應(yīng)用微衛(wèi)星分析(short tandem repeat， STRs)及聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment leng

2、th polymorphism，PCR-PFLP)的方法對(duì)中國(guó)東北地區(qū)痤瘡與雄激素受體基因第一外顯子CAG、GGN的重復(fù)序列長(zhǎng)度多態(tài)性，以及AR Stu Ⅰ的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性進(jìn)行了研究，從分子遺傳學(xué)的角度探討?zhàn)畀彽陌l(fā)病機(jī)制。 材料和方法： 一、研究對(duì)象 1、沈陽(yáng)市5所高校作為抽樣調(diào)查學(xué)校，以全日制在校大學(xué)本科生為調(diào)查對(duì)象，每個(gè)學(xué)校按年級(jí)(大一至大四，共4個(gè)年級(jí))隨機(jī)抽取學(xué)生250人，共計(jì)5000人。

3、2、病例組：238例痤瘡患者，年齡16～37歲(平均22.29±3.02歲)，男性126例，女性112例(論文二)；522例痤瘡患者，年齡16～39歲(平均21.76±3.31歲)，其中男性289例，女性233例(論文三)，均來(lái)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科門診。符合Pillsbury診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，且彼此間無(wú)血緣關(guān)系。 3、對(duì)照組：207例健康志愿者，年齡16～38歲(平均22.07±3.09歲)。男性109例，女性98例(

4、論文二)；337例健康志愿者，年齡16～38歲(平均21.86±3.41歲)，其中男性156例，女性181例(論文三)。 二、實(shí)驗(yàn)材料 10％SDS、EDTA、蛋白酶K、Tris飽和酚、氯仿、醋酸鈉、無(wú)水乙醇、TE緩沖液、瓊脂糖、DNA聚合酶AmpliTaq Gold、熒光引物、2xTaq Plus PCR MasterMix聚合酶、限制性內(nèi)切酶Stu I。 三、實(shí)驗(yàn)方法 1、采用統(tǒng)一的流行病學(xué)調(diào)查表，以

5、整群隨機(jī)抽樣的方法選取沈陽(yáng)市5所高校5000名大學(xué)本科生作為研究樣本，應(yīng)用“痤瘡調(diào)查表”進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)問卷調(diào)查。 2、采用STRs的方法分析CAG及GGN重復(fù)序列的長(zhǎng)度多態(tài)性。 3、采用PCR-RFLP的方法對(duì)ARStu I等位基因進(jìn)行分型。 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有統(tǒng)計(jì)學(xué)分析過程均采用SPSS13.0軟件完成。統(tǒng)計(jì)方法主要包括t檢驗(yàn)、X2檢驗(yàn)、單因素及多因素非條件logistic回歸分析等。P<0.05即具有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義。根據(jù)Hardy-Weinberg平衡定律計(jì)算各基因型個(gè)體數(shù)的期望值。Hardy-Weinberg平衡吻合性檢驗(yàn)、組間基因型頻率及等位基因頻率的差異性比較采用X2檢驗(yàn)，并以優(yōu)勢(shì)比(odds ratio，OR)及其95％可信區(qū)間(confidende interval，CI)表示相對(duì)危險(xiǎn)度。 結(jié)果： 1、痤瘡的流行病學(xué)調(diào)查 (1) 痤瘡的總患病率為51.3％，其中男生患病率為52.75％，女生患病患病率為49

7、.65％，男女間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=4.630，P<0.031)。 (2) 痤瘡組一級(jí)親屬患痤瘡的風(fēng)險(xiǎn)性顯著高于非痤瘡組(OR：4.68；95％CI：3.81～5.69；P<0.001)。 (3) 有家族史者平均發(fā)病年齡16.24±2.32，無(wú)家族史者平均發(fā)病年齡16.67±2.31，二者的差異有顯著性(F=0.059，P<0.001)。 (4) 痤瘡發(fā)病的危險(xiǎn)因素分別為：家族史、精神緊張、月經(jīng)失調(diào)、經(jīng)常失眠

8、、油膩食品、男性、痛經(jīng)、焦慮、睡眠<8小時(shí)、抑郁、煎炸食品、學(xué)習(xí)壓力大、辛辣食品、油性皮膚、混合性皮膚，保護(hù)性因素依次為：干性皮膚、中性皮膚、經(jīng)常吃水果、每天接觸電腦時(shí)間短。其中家族史位于危險(xiǎn)因素的首位(OR：4.695)。 2、雄激素受體基因第一外顯子CAG及GGN重復(fù)序列長(zhǎng)度多態(tài)性與痤瘡相關(guān)性研究 (1)長(zhǎng)/短CAG片段在男性病例和對(duì)照中的分布有顯著性差異(P=0.008)，男性攜帶CAG短片段比攜帶CAG長(zhǎng)片段其患

9、痤瘡的風(fēng)險(xiǎn)性明顯增加(OR:2.07；95％CI:1.21-3.54)。 (2)長(zhǎng)/短CAG片段在女性病例和對(duì)照中的分布有顯著性差異(P=0.013)，攜帶CAG短片段的女性患痤瘡的風(fēng)險(xiǎn)性明顯增加(OR:2.05；95％CI:1.18-3.56)。 (3)攜帶有短CAG/短GGN片段的男性患痤瘡的風(fēng)險(xiǎn)性較攜帶有長(zhǎng)CAG/長(zhǎng)GGN片段的男性明顯增加(OR:3.33；95％CI:1.10-10.07；P<0.05)。

10、 3、雄激素受體基因第一外顯子AR Stu I限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性與痤瘡的相關(guān)性研究 (1) 痤瘡組和正常對(duì)照人群AR基因第一外顯子ARStu Ⅰ基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。 (2) AR基因StuI等位基因頻率在男性病例和對(duì)照組間的分布有顯著性差異(OR:2.64；95％CI:1.22～5.73；P=0.01)。 (3) AR基因StuI等位基因頻率在女性病例和對(duì)照組間的分布有顯著性差異

11、(OR:2.13;95％CI：1.18～3.84；P=0.01)，AR基因StuI基因型頻率在女性病例和對(duì)照組間的分布有顯著性差異(OR:1.97；95％CI:1.02～3.79；P=0.04)。 結(jié)論： 1、痤瘡是沈陽(yáng)地區(qū)大學(xué)生的常見皮膚病之一。 2、家族史、精神緊張、月經(jīng)失調(diào)、經(jīng)常失眠、油膩食品、男性、痛經(jīng)、焦慮、睡眠<8小時(shí)、抑郁、煎炸食品、學(xué)習(xí)壓力大、辛辣食品、油性皮膚、混合性皮膚為痤瘡發(fā)病的危險(xiǎn)因素；干

12、性皮膚、中性皮膚、經(jīng)常吃水果、每天接觸電腦時(shí)間短為痤瘡發(fā)病的保護(hù)性因素。 3、痤瘡組一級(jí)親屬的患病風(fēng)險(xiǎn)性顯著高于對(duì)照組。有家族史的患者較無(wú)家族史者患痤瘡的發(fā)病年齡早，家族史在痤瘡的發(fā)病中起重要的作用。 4、AR基因第一外顯子CAG的重復(fù)多態(tài)性與痤瘡的發(fā)生有關(guān)，CAG重復(fù)次 數(shù)較少的男性和女性個(gè)體患痤瘡的危險(xiǎn)性都明顯增加。 5、AR基因第一外顯子GGN的重復(fù)多態(tài)性作為獨(dú)立因素與痤瘡發(fā)生沒有明顯的相關(guān)性，但短