雄激素、雄激素受體水平和AR基因多態(tài)性與老年男性高血壓及PAOD的相關(guān)研究.pdf

1、高血壓是最常見的心血管病。近50年來我國高血壓患病率明顯增高，尤其是60歲以上老年人群。周圍動脈硬化閉塞病與心腦血管疾病有共同的危險因素，是全身血管系統(tǒng)性動脈硬化的標(biāo)志。男性性別是獨立的心血管危險因子，這提示雄激素與心血管病之間可能存在一定的關(guān)系。一些臨床研究已初步顯示：冠心病、高血壓和肥胖者有著較低的雄激素水平。 體內(nèi)雄激素是通過雄激素受體發(fā)揮生理作用。雄激素受體的活性則通過雄激素受體基因調(diào)控。雄激素受體(CAG)n多態(tài)

2、性與雄激素水平的關(guān)系并不十分明確。我們采用流式細(xì)胞技術(shù)研究淋巴細(xì)胞雄激素受體，并建立了該項技術(shù)的檢測方法。通過雄激素-雄激素受體-雄激素受體基因三個環(huán)節(jié)來闡明雄激素的生物學(xué)效應(yīng)與高血壓的關(guān)系。為防治高血壓和動脈硬化提供新策略。 第一部分 雄激素、雄激素受體水平與老年男性高血壓及PAOD的相關(guān)研究 目的：研究雄激素、雄激素受體與老年男性高血壓和周圍動脈硬化閉塞病的關(guān)系。 方法：隨機(jī)抽取北京萬壽路地區(qū)323例

3、60-92歲的男性。其中健康人104例，高血壓172例，周圍動脈硬化閉塞病44例。采用化學(xué)發(fā)光法測定血清黃體生成素、卵泡刺激素、雌二醇和總睪酮；酶聯(lián)免疫法測定血清游離睪酮、硫酸脫氫表雄酮和性激素結(jié)合球蛋白。使用流式細(xì)胞技術(shù)檢測外周淋巴細(xì)胞雄激素受體密度和雄激素受體陽性標(biāo)記率。 結(jié)果：(1)隨年齡增長血清LH，F(xiàn)SH和SHBG增高，血清TT，F(xiàn)T和DHEA-s下降，p＜0.05。各組AR陽性率和AR熒光強(qiáng)度的下降未見統(tǒng)計學(xué)意義，p

4、＞0.05。(2)隨腰圍逐漸增大，舒張壓和E2/T逐漸增高；肥胖組TT下降、E2增高，p＜0.05。(3)高血壓患者BMI(25.89±2.99對24.491+2.79)、腰圍(91.750±9.61對86.61±8.913)、腰臀比(0.906±0.053對0.879±0.057)明顯增高，p=0.000。TT(15.02±5.33對17.10±6.143)明顯下降，E2/T(6.94±3.89對5.76±2.69)明顯升高，p＜0.

5、01。隨著高血壓病程延長，BMI、腰圍、腰臀比和E2/T增加，TT和AR熒光強(qiáng)度降低，p＜0.05。Logistic回歸分析：腰臀比(OR=7659.883)，E2/T(OR=1.130)與高血壓正相關(guān)；AR熒光強(qiáng)度(OR=0.729)與高血壓負(fù)相關(guān)，p＜0.05。(4)周圍動脈硬化閉塞病患者腰圍(90.75±8.38對86.61±8.91)，腰臀比(0.905±0.051對0.879±0.057)，收縮壓(140.91±20.55對1

6、30.03±16.69)，舒張壓(83.07±14.15對77.21±9.34)，E2/T(7.32±3.317對5.76±2.69)明顯增高，p＜0.05；而AR熒光強(qiáng)度(2.92±0.97對3.36±1.05)明顯下降，p＜0.05。Logistic回歸分析：E2與PAOD正相關(guān)，TT與PAOD負(fù)相關(guān)，p＜0.05。 (5)與臨床病史的相關(guān)分析中看出：BMI(r=0.199，p=0.000)和E2/T(r=0.138，p=0

7、.013)與高血壓史正相關(guān)，p＜0.05；LH，F(xiàn)SH，TT與糖尿病史相關(guān)，p＜0.05。但控制年齡因素的影響后，BMI(r=0.1763，p=0.002)和E2/T(r=0.1366，p=0.018)仍與高血壓史相關(guān)。LH(r=0.1665，p=0.004)和E2/T(r=0.1195，p=0.039)與糖尿病史相關(guān)。其余的相關(guān)關(guān)系不再顯著。(6)相關(guān)與回歸分析顯示：與年齡相關(guān)的性激素有LH，F(xiàn)SH，TT，F(xiàn)T，SHBG，DHEA-s

8、，p＜0.05；與收縮壓相關(guān)的性激素有TT(p=0.022)和E2/T(p=0.000)；與舒張壓相關(guān)的因素有E2(p=0.002)、E2/T(p=0.001)和AR熒光強(qiáng)度(p=0.008)；控制BMI因素后，上述相關(guān)關(guān)系依然存在。AR陽性率與AR熒光強(qiáng)度高度相關(guān)(r=0.772，p=0.000) 結(jié)論：(1)隨年齡增長LH，F(xiàn)SH和SHBG增高，TT，F(xiàn)T和DHEA-s下降。(2)肥胖患者TT下降、E2增高，p＜0.05。(

9、3)高血壓患者BMI、腰圍、腰臀比明顯增高，TT明顯下降，E2/T明顯升高。隨著高血壓病程延長，BMI、腰圍、腰臀比和E2/T增加，TT和AR熒光強(qiáng)度降低。(4)周圍動脈硬化閉塞病患者腰圍、腰臀比、收縮壓、舒張壓、E2/T明顯增高，而AR熒光強(qiáng)度明顯下降。Logistic回歸分析：E2與PAOD正相關(guān)，TT與PAOD負(fù)相關(guān)，p＜0.05。(5)與臨床病史的相關(guān)分析中看出：BMI和E2/T與高血壓史正相關(guān)；LH，F(xiàn)SH，TT與糖尿病史相關(guān)

10、。但控制年齡因素的影響后，僅BMI、E2/T仍與高血壓史相關(guān)，LH、E2/T仍與糖尿病史相關(guān)。(6)控制BMI因素后，與收縮壓相關(guān)的性激素有TT和E2/T；與舒張壓相關(guān)的有E2、E2/T和AR熒光強(qiáng)度。 第二部分 老年男性雄激素受體基因(CAG)n重復(fù)多態(tài)性與體脂含量、雄激素水平的相關(guān)研究 目的：研究雄激素受體基因CAG重復(fù)長度與體脂含量和雄激素水平的關(guān)系 方法：隨機(jī)抽取北京萬壽路地區(qū)319例60-92歲

11、的男性。其中健康人102例，高血壓172例，周圍動脈硬化閉塞病44例，采用化學(xué)發(fā)光法測定血清黃體生成素、卵泡刺激素、雌二醇和總睪酮；酶聯(lián)免疫法測定血清游離睪酮、硫酸脫氫表雄酮和性激素結(jié)合球蛋白。使用流式細(xì)胞技術(shù)檢測外周淋巴細(xì)胞雄激素受體密度(MFC)和雄激素受體陽性標(biāo)記率。酚/氯仿抽提核酸法提取外周白細(xì)胞基因組DNA，用PCR方法擴(kuò)增AR基因外顯子1NH2端轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)約430bp左右片段，再經(jīng)過DNA測序儀分析CAG重復(fù)數(shù)。 結(jié)

12、果：(1)319例老年男性AR基因CAG重復(fù)數(shù)最短為8，最長為35。CAG重復(fù)數(shù)最多的為21(13.8％)，22(15.7％)，23(13.5％)和24(10.3％)。(CAG)n≤20者占21％，(CAG)n≥25者占25.7％。CAG重復(fù)數(shù)平均值為22.70±3.66。(2)高血壓患者與健康人比較：CAG重復(fù)數(shù)最短為10(對8)，最長為33(對35)。CAG重復(fù)數(shù)最多的為21(10.6％對17.6％)，22(17.6％對14.7％)

13、，23(11.8％對15.7％)和24(12.4％對6.9％)。CAG重復(fù)數(shù)平均值為22.59±3.46對22.83±3.97，p＞0.05。故兩組人群(CAG)n重復(fù)數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異。(3)隨著(CAG)n數(shù)目的增多，BMI逐漸增大，但僅在(CAG)n≥23的人群的BMI變化有統(tǒng)計學(xué)意義，p＜0.05。而隨(CAG)n數(shù)目增加，血壓、性激素和雄激素受體變化均無統(tǒng)計學(xué)意義，p＞0.05。(4)多元線性回歸后，收縮壓、舒張壓、SHBG、E2

14、/T與BMI、腰圍及腰臀比相關(guān)，p＜0.01；TT與BMI(r=-0.204，p=0.000)及腰圍(r=-0.182，p=0.001)負(fù)相關(guān)，p＜0.01；E2僅與腰圍正相關(guān)(r=0.129，p=0.020)。CAG重復(fù)數(shù)僅與BMI正相關(guān)(r=0.113，p=0.044)。控制年齡因素的影響后，CAG重復(fù)數(shù)與BMI的相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.1029，p=0.067)，其它相關(guān)關(guān)系依然顯著；而LH，F(xiàn)SH，TT，F(xiàn)T，E2，SHBG

15、，DHEA-s，AR熒光強(qiáng)度和AR陽性率與不相關(guān)。SBP，DBP，LH，F(xiàn)SH，TT，E2，F(xiàn)T，SHBG，DHEA-s，以及AR陽性率和AR平均熒光強(qiáng)度與CAG重復(fù)數(shù)不相關(guān)。 結(jié)論：(1)老年男性AR基因CAG重復(fù)數(shù)在8-35之間。平均值為22.70±3.66。(2)高血壓與健康人比較CAG重復(fù)數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異。(3)在(CAG)n＞23的人群，隨著(CAG)n數(shù)目的增多，BMI逐漸增大。(4)多元線性回歸后，收縮壓、舒張壓、S