帕金森病模型大鼠黑質(zhì)GDNF、GFAP和整合素αM的表達(dá)及藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的：觀察帕金森病（Parkinson's disease, PD）模型大鼠黑質(zhì)內(nèi)酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase, TH）、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF）、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）和整合素αM（CD11b）的表達(dá)及咪多吡干預(yù)對(duì)其表達(dá)的影響，探討神經(jīng)營

2、養(yǎng)因子和炎癥反應(yīng)在PD發(fā)生發(fā)展中的作用及咪多吡治療PD的作用機(jī)制。
　　方法：1.72只健康 SD大鼠隨機(jī)分為：對(duì)照組、帕金森病模型組（模型組）和咪多吡治療組（咪多吡組），每組又隨機(jī)分為模型制備成功后4d和8d兩個(gè)亞組，每個(gè)亞組各12只，其中6只用于免疫組化染色，另外6只用于 Western blotting檢測。2.采用頸背部皮下注射魚藤酮制備帕金森病模型大鼠。3.模型制備成功后每日灌胃給咪多吡（0.5mg/kg），分別連續(xù)給藥

3、4d和8d。4.用行為學(xué)評(píng)分測定大鼠的行為能力變化情況；免疫組化法和Western blotting法檢測黑質(zhì) TH和GDNF、GFAP、CD11b表達(dá)水平。5.組織切片采用 OLYMPUS攝像顯微鏡（400×）攝像，并應(yīng)用Motic Med6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，Western blotting結(jié)果用Image J分析。6.采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，組間比較采用單

4、因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.對(duì)照組大鼠黑質(zhì)可見多量 TH陽性細(xì)胞表達(dá)和一定量 GDNF陽性細(xì)胞表達(dá)，8d和4d比較無顯著性差異（均P>0.05）。模型組TH陽性細(xì)胞表達(dá)和GDNF陽性細(xì)胞表達(dá)均明顯減少，與對(duì)照組比較均有顯著性差異（均 P<0.05），8d少于4d，無顯著性差異（均 P>0.05）。咪多吡組 TH陽性細(xì)胞表達(dá)和GDNF陽性細(xì)胞表達(dá)均增多，與模型組比較均明顯增多（均 P<0.05），

5、8d多于4d，有顯著性差異（均P<0.05）。2.對(duì)照組GFAP和CD11b陽性細(xì)胞均處于靜息狀態(tài)，GFAP陽性細(xì)胞胞體細(xì)長不規(guī)則，有細(xì)長的突起，CD11b陽性細(xì)胞胞體較小，呈分支狀，突起較細(xì)長；模型組 GFAP和CD11b陽性細(xì)胞呈激活狀態(tài)，GFAP陽性細(xì)胞胞體肥大，突起增多增粗，CD11b陽性細(xì)胞胞體增大，突起變粗變短，數(shù)量增多；咪多吡組與模型組比較，GFAP陽性細(xì)胞胞體及突起較細(xì)長，CD11b陽性細(xì)胞胞體較小，突起較細(xì)長，數(shù)量減少

6、。對(duì)照組大鼠黑質(zhì)可見少量的GFAP和CD11b陽性細(xì)胞表達(dá)，8d與4d比較無顯著性差異（均P>0.05）；模型組GFAP和CD11b陽性細(xì)胞表達(dá)均明顯增多，與對(duì)照組比較均有顯著性差異（均 P<0.05），8d多于4d，無顯著性差異（均 P>0.05）；咪多吡組 GFAP和CD11b陽性細(xì)胞表達(dá)均明顯減少，與模型組比較均有顯著性差異（均 P<0.05），8d少于4d，有顯著性差異（均P<0.05）。
　　結(jié)論：1.帕金森病模型大鼠黑