垂體腺瘤分子生物學(xué)特征和手術(shù)治療的研究.pdf

1、第一部分Nucleostemin和ASPP2在垂體腺瘤組織的表達(dá)及意義,垂體腺瘤是常見的顱內(nèi)腫瘤，發(fā)病率約占顱內(nèi)腫瘤的10％。根據(jù)其生物學(xué)行為將垂體腺瘤分為非侵襲性與侵襲性垂體腺瘤。侵襲性垂體腺瘤組織學(xué)形態(tài)屬于良性，但卻具有某些惡性腫瘤的生長特征，因全切率相對低，復(fù)發(fā)率較高，而備受重視。垂體腺瘤的發(fā)病機(jī)制是一個(gè)涉及多步驟、多因素的過程，諸如遺傳素質(zhì)、基因的突變、下丘腦激素分泌等在垂體腺瘤的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮不同的作用，但其具體發(fā)生機(jī)制仍不完

2、全清楚。所以，探索垂體腺瘤的發(fā)病機(jī)制，研究垂體腺瘤的臨床特征，從而開發(fā)出新的判斷預(yù)后指標(biāo)和治療方法是十分必要的。 大量研究表明p53基因突變在惡性腫瘤的進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，但垂體腺瘤組織學(xué)上是良性腫瘤，p53基因突變在垂體腺瘤中的發(fā)生率非常低，野生型p53蛋白為何不能發(fā)揮作用阻止腫瘤的發(fā)生?推測可能是一些參與p53功能調(diào)控的某些基因發(fā)生改變，進(jìn)而抑制p53的功能，引起p53生理功能的喪失。野生型p53功能的改變可能在垂體腺瘤的發(fā)

3、生、發(fā)展中發(fā)揮更為重要的作用。 最近發(fā)現(xiàn)的p53凋亡刺激蛋白(apoptosisstimulatingproteinofp53，ASPP)是一個(gè)蛋白質(zhì)家族，其成員有3個(gè)：ASPP1、ASPP2和iASPP。它們與p53形成復(fù)合物后，對p53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有不同的作用。ASPP1和ASPP2的作用都是增強(qiáng)p53的促凋亡基因啟動(dòng)子與DNA的結(jié)合，促進(jìn)p53凋亡基因啟動(dòng)子的活化，增強(qiáng)p53的細(xì)胞凋亡功能。而iASPP則是競爭性地抑制AS

4、PP1和ASPP2與相應(yīng)結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，從而抑制p53的抑癌功能。 目的：研究nucleostemin、ASPP2基因mRNA和Ki-67抗原在垂體腺瘤中的表達(dá)情況，分析其與垂體腺瘤侵襲性、腫瘤大小、病理類型、卒中及性別等臨床資料的關(guān)系，進(jìn)一步分析nucleostemin、ASPP2基因在垂體腺瘤細(xì)胞增值和垂體腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用。 材料與方法：收集2004年1月～2005年8月間我院神經(jīng)外科手術(shù)切除垂體腺瘤標(biāo)本71例。

5、采用半定量RT-PCR方法檢測垂體腺瘤標(biāo)本中nucleostemin和ASPP2基因mRNA的表達(dá)情況，采用免疫組化方法檢測垂體腺瘤石蠟切片中Ki-67抗原的表達(dá)情況。同時(shí)收集相關(guān)的臨床資料。 結(jié)果：(1)本組71例垂體腺瘤手術(shù)標(biāo)本均有nucleostemin基因mRNA表達(dá)，其中nucleostemin在PRL腺瘤中表達(dá)水平最高，在無功能腺瘤中表達(dá)最低，但不同病理類型之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(2)71例垂體腺瘤手

6、術(shù)標(biāo)本均有ASPP2基因mRNA表達(dá)，其中在PRL腺瘤中表達(dá)水平最低，在GH腺瘤中表達(dá)最高，但不同病理類型之間差異無顯著性(P＞0.05)。(3)Ki-67LI在功能性垂體腺瘤和無功能性垂體腺瘤之間差異有顯著性(P＜0.05)。在PRL腺瘤中表達(dá)最高，在無功能腺瘤中最低，泌乳素腺瘤和無功能腺瘤的Ki-67LI差異有高度顯著性(P＜0.01)，泌乳素腺瘤和促性腺細(xì)胞腺瘤之間差異有顯著性(P＜0.05)，無功能腺瘤和生長激素腺瘤、多激素腺瘤

7、的Ki-67LI之間也存在顯著性差異(P＜0.05)。(4)在不同病理類型的垂體腺瘤中，患者的年齡之間存在差異(P＜0.05)，促性腺細(xì)胞腺瘤患者的平均年齡最高，ACTH腺瘤患者的平均年齡最低。促性腺細(xì)胞腺瘤患者的平均年齡和ACTH腺瘤患者的平均年齡之間存在高度顯著性差異(P＜0.01)，促性腺細(xì)胞腺瘤患者的平均年齡和生長激素腺瘤患者的平均年齡之間存在顯著性差異(P＜0.05)。(5)nucleostemin、ASPP2mRNA及Ki-

8、67LI在卒中垂體腺瘤和非卒中垂體腺瘤中的表達(dá)差異無顯著性(P＞0.05)。(6)侵襲性垂體腺瘤中的患者年齡、腫瘤平均長徑、nucleostemin和ASPP2mRNA表達(dá)以及Ki-67LI均高于非侵襲垂體腺瘤。非侵襲垂體腺瘤和侵襲性垂體腺瘤中，腫瘤平均長徑、nucleostemin及ASPP2基因表達(dá)存在高度顯著性差異(P＜0.01)，患者年齡及Ki-67LI存在顯著性差異(P＜0.05)，病程差異無顯著性(P＞0.05)；在侵襲性和

9、非侵襲性垂體腺瘤中男女性別分布沒有差異(P＞0.05)，功能性垂體腺瘤和非功能性垂體腺瘤在侵襲性上也沒有差別(P＞0.05)。(7)在隨訪的64例患者中5例復(fù)發(fā)(7.8％)，在復(fù)發(fā)組中腫瘤平均長徑、病程、nucleostemin基因表達(dá)水平和Ki-67LI均高于未復(fù)發(fā)組，平均患者年齡和ASPP2基因表達(dá)水平低于未復(fù)發(fā)組。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組中Ki-67LI之間存在顯著性差異(P＜0.05)，而患者年齡、病程、腫瘤平均長徑、及n

10、ucleostemin和ASPP2基因表達(dá)水平在兩組間無顯著性差異(P＞0.05)。(8)NucleosteminmRNA表達(dá)水平與Ki-67LI呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.237，P＜0.05)，ASPP2mRNA基因表達(dá)水平與Ki-67LI呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.256，P＜0.05)，nucleostemin和ASPP2mRNA表達(dá)水平之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.340，P＜0.01)。(9)男性垂體腺瘤患者的年齡、腫瘤平均長徑明顯大于

11、女性垂體腺瘤患者，差異有高度顯著性(P＜0.01)。 結(jié)論：(1)nucleostemin和ASPP2基因在人垂體腺瘤組織有表達(dá)。(2)nucleostemin、ASPP2表達(dá)水平以及Ki-67LI在不同病理類型垂體腺瘤中存在差異，說明不同病理類型垂體腺瘤的分子生物學(xué)特征存在不同，并可能與腫瘤侵襲性相關(guān)。(3)不同病理類型垂體腺瘤在年齡上存在差異，說明垂體腺瘤在不同年齡段可能存在有好發(fā)病理類型。(4)在垂體腺瘤中，nucleos

12、temin表達(dá)水平與腫瘤的增殖活性呈正相關(guān)性，ASPP2mRNA表達(dá)水平與腫瘤的增殖活性呈負(fù)相關(guān)性。(5)nucleostemin和Ki-67表達(dá)水平越高、ASPP2表達(dá)水平越低、年齡和腫瘤的最大直徑越大腫瘤發(fā)生侵襲的概率越高，不同性別患者腫瘤的侵襲性沒有差異。(6)Ki-67LI可以作為一項(xiàng)判斷垂體腺瘤復(fù)發(fā)的有效臨床檢測指標(biāo)。(7)在垂體腺瘤中nucleostemin基因表達(dá)增高、ASPP2基因表達(dá)降低和Ki-67表達(dá)水平升高三者之間