antagomiR-103與阿霉素作用于TGF-β1誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞對(duì)其EMT及細(xì)胞存活率的影響.pdf

1、《中國(guó)圖書資料分類法》分類號(hào)：R737.9單位代碼：10660學(xué)號(hào)：S110063貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院20142014屆碩士學(xué)位論文屆碩士學(xué)位論文antagomiR103與阿霉素作用于與阿霉素作用于TGFTGFβ1誘導(dǎo)的導(dǎo)的HepG2HepG2細(xì)胞對(duì)其細(xì)胞對(duì)其EMTEMT及細(xì)胞存活率的及細(xì)胞存活率的影響影響研究生：王金利導(dǎo)師：沈祥春教授張敏副教授年級(jí)：2011級(jí)專業(yè)：藥理學(xué)2014年4月15日antagomiR103與阿霉素阿霉素聯(lián)合作

2、用于聯(lián)合作用于TGFTGFβ1誘導(dǎo)的誘導(dǎo)的HepG2HepG2細(xì)胞細(xì)胞對(duì)其EMTEMT及細(xì)胞存活率的影響細(xì)胞存活率的影響專業(yè)名稱：藥理學(xué)研究生：王金利導(dǎo)師：沈祥春張敏摘要摘要：目的探討antagomiR103對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞（HepG2）發(fā)生上皮間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化（EMT）的影響；阿霉素（ADM）對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞存活率的影響；antagomiR103與ADM聯(lián)合用藥對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞存

3、活率的影響。方法（1）HepG2細(xì)胞體外培養(yǎng)，通過(guò)光學(xué)倒置顯微鏡觀察對(duì)照組、TGFβ1組細(xì)胞形態(tài)的變化使用蛋白質(zhì)免疫印記法（westernblot）檢測(cè)兩組細(xì)胞中ECadherin、NCadherin、Vimentin的表達(dá)變化；（2）使用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TGFβ1、antagomiR103對(duì)HepG2細(xì)胞遷移能力的影響、antagomiR103對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞遷移能力的影響；（3）使用westernblot檢測(cè)各

4、處理組細(xì)胞中ECadherin、NCadherin、Vimentin的表達(dá)變化；（4）應(yīng)用MTT法檢測(cè)ADM組、TGF1ADM組、ADMantagomiR103組、ADMantagomiR103TGFβ1組HepG2細(xì)胞的存活率，根據(jù)公式計(jì)算并比較ADM的IC50。結(jié)果（1）在相同時(shí)段，與control組、antagomiR103組相比較，TGFβ1促進(jìn)HepG2細(xì)胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為(52.336.658)%、（

5、87.335.033）%、（97.002.646）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；（2）在相同時(shí)段，與control組、TGFβ1組相比較，antagomiR103抑制HepG2細(xì)胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為（9.8330.7638）%、（13.001.114）%、（10.831.041）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；(3)在相同時(shí)段，與control組、TGFβ1組相比較，antagomiR103抑制TGF

6、β1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為（21.672.887）%，（31.005.292）%，（41.006.557）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；（4）TGFβ1使ECadherin表達(dá)下調(diào)，NCadherin表達(dá)上調(diào)，Vimentin表達(dá)上調(diào)（P＜0.05）（5）antagomiR103使ECadherin表達(dá)上調(diào)，NCadherin表達(dá)下調(diào)，Vimentin表達(dá)下調(diào)（P＜0.05）；（6

7、）ADM作用于HepG2細(xì)胞，ADM半數(shù)抑制濃度（IC50）為6.699mgL；ADM作用于TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞，ADM的IC50為8.698mgL；ADM與antagomiR103共同作用于HepG2細(xì)胞，ADM的IC50為3.826mgL；ADM與antagomiR103共同作用于TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞，ADM的IC50為3.913mgL。（7）隨著ADM濃度的增高，細(xì)胞存活率逐漸降低。ADM濃

8、度相同時(shí)不同藥物組之間比較，當(dāng)ADM濃度為25mgL時(shí)，antagomiR103ADM組的細(xì)胞存活率明顯低于其他藥物組（P＜0.01）。結(jié)論（1）antagomiR103抑制HepG2細(xì)胞發(fā)生遷移，對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)發(fā)生EMT的HepG2細(xì)胞的遷移能力也有抑制作用；（2）antagomiR103抑制HepG2細(xì)胞發(fā)生EMT；（3）antagomiR103與ADM聯(lián)合用藥對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生EMT的能力有抑制作用；（4）ant