Ca2+選擇性增強(qiáng)阿霉素誘導(dǎo)HepG2凋亡作用及機(jī)制.pdf

1、肝癌發(fā)病率高、進(jìn)展快、惡性程度高,是世界上最常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率在全世界范圍內(nèi)位居第五。由于化療藥物的選擇性差,化療效果一直不理想。我們前期的研究顯示Ca2+能選擇性增強(qiáng)化療藥阿霉素(ADM)對HepG2細(xì)胞的增殖抑制作用。而我們所使用的化療藥物中許多化療藥物作用機(jī)制主要是通過抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡來起到抗癌作用,而在細(xì)胞凋亡過程中線粒體通路起著非常重要作用。因此,本文研究Ca2+對阿霉素(ADM)誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞和L02細(xì)

2、胞凋亡的影響,以及線粒體凋亡通路參與機(jī)制。
　　第一部分Ca2+對阿霉素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞和L02細(xì)胞凋亡影響的研究
　　目的:探討Ca2+對阿霉素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞和LO2細(xì)胞凋亡的影響
　　方法:用單獨(dú)阿霉素(ADM0.1μg/mL)、Ca2+(9mM)及聯(lián)合組(阿霉素0.1μg/mL+Ca2+9mM)分別處理L02細(xì)胞和HepG2細(xì)胞48h。用流式細(xì)胞儀檢測兩種細(xì)胞的凋亡率。
　　結(jié)果:單獨(dú)阿霉素組,L02

3、細(xì)胞的凋亡率高于HepG2的凋亡率(P<0.05)。與單獨(dú)阿霉素組比較,鈣與阿霉素聯(lián)合處理后,L02細(xì)胞凋亡率無顯著變化(P>0.05),但是HepG2細(xì)胞的凋亡率顯著增加(P<0.05),高于L02細(xì)胞的凋亡率(P<0.05)。
　　結(jié)論:在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍,Ca2+能顯著提高阿霉素致肝癌細(xì)胞HepG2的凋亡作用,但不增加肝正常細(xì)胞L02的凋亡。
　　第二部分Ca2+對阿霉素致HepG2細(xì)胞和L02細(xì)胞凋亡影響的機(jī)制研究

4、r>　　目的:探討Ca2+選擇性增強(qiáng)阿霉素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的機(jī)制
　　方法:用單獨(dú)阿霉素(0.1μg/mL)、Ca2+(9mM)及聯(lián)合組(阿霉素0.1μg/mL+Ca2+9mM)分別處理L02細(xì)胞和HepG2細(xì)胞48h。用Western blot檢測細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白bcl-2、bax、caspase-3前體(procaspase-3)的表達(dá)量,酶標(biāo)儀檢測蛋白caspase-3的酶活性。
　　結(jié)果:與阿霉素組相比,聯(lián)合處

5、理組HepG2細(xì)胞bax蛋白表達(dá)量明顯升高(P<0.05),procaspase-3、bcl-2蛋白表達(dá)量降低(P<0.05),活化caspase-3酶活性升高(P<0.05),而在LO2細(xì)胞,procaspase-3、bcl-2、bax蛋白表達(dá)量均無明顯改變(P>0.05),活化caspase-3酶活性也沒有明顯變化(P>0.05)。
　　結(jié)論:Ca2+能選擇性顯著提高阿霉素致HepG2細(xì)胞凋亡作用機(jī)制可能是通過提高線粒體通路凋