海南地區(qū)幽門螺桿菌對多種抗生素耐藥性的探討.pdf

1、目的:
　　 1.評估E—test法檢測利福平和四環(huán)素耐藥性的可靠程度,為臨床提供方便的檢測手段。
　　 2.檢測幽門螺桿菌對克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林、利福平、四環(huán)素的最低抑菌濃度,計算耐藥率,比較男性與女性、慢性胃炎與消化性潰瘍、城市與農(nóng)村患者幽門螺桿菌感染株的耐藥差異,了解海南地區(qū)幽門螺桿菌的耐藥情況,指導臨床醫(yī)生合理使用抗生素。
　　 方法:2008年7月到2009年7月在海南省人民醫(yī)院行胃鏡檢查并行

2、幽門螺桿菌培養(yǎng)的患者共321例,年齡17—82歲(平均50歲)。經(jīng)胃鏡檢查取得活檢標本,在微需氧環(huán)境(含5％的O2、10％的CO2、85％的N2)培養(yǎng)。符合菌落、形態(tài)特征,尿素酶、氧化酶試驗均陽性者確定為幽門螺桿菌。最終,分離出幽門螺桿菌菌株95例用于試驗,分離自95位患者.其中男性45例、女性50例,慢性胃炎52例、消化性潰瘍41例、胃癌2例,城市人員60例、農(nóng)村人員35例。試驗所需抗菌藥物粉末均由Sigma公司生產(chǎn)。所有藥物均在使用

3、當天按照美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI)規(guī)定新鮮溶解和配置。用瓊脂稀釋法和E-test法同時檢測幽門螺桿菌對利福平和四環(huán)素的耐藥性。按照臨床實驗室標準化研究所(CLSI)的規(guī)定進行瓊脂稀釋法檢測利福平和四環(huán)素的敏感性。取利福平和四環(huán)素的菌懸液分別點樣接種到各個不同藥物濃度的培養(yǎng)基上。將瓊脂平板于37℃微需氧環(huán)境(含5％的O2、10％的CO2、85％的N2)中培養(yǎng),72小時后觀察結(jié)果。以無菌生長的藥物最低稀釋度作為最低抑菌濃度(MI

4、C)。按照說明書用E-test法檢測利福平和四環(huán)素的敏感性。將E—test試劑條貼放在瓊脂表面。將瓊脂平板于37℃微需氧環(huán)境中培養(yǎng),72小時后觀察結(jié)果。于橢圓形抑菌環(huán)與E—test試劑條的交界點讀取MIC值。同樣的,用E-test法檢測幽門螺桿菌對克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林的耐藥性。每次試驗用ATCC43504質(zhì)控菌株作參照。
　　 統(tǒng)計學處理:本研究數(shù)據(jù)處理使用統(tǒng)計軟件SAS9.0進行統(tǒng)計分析。計量資料的相關(guān)分析若資料服從

5、正態(tài)分布使用pearson相關(guān)分析,若資料不服從正態(tài)分布使用spearman等級相關(guān)分析,計數(shù)資料組間率的比較采用x2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果:
　　 (1)在瓊脂稀釋法檢測的95株幽門螺桿菌菌株中,利福平的耐藥率為1.1％,MIC范圍0.004～8mg/L,MIC50為0.03125mg/L,MIC90為0.25mg/L；四環(huán)素的耐藥率為0％,MIC范圍0.0156～2mg/L,MIC50為0

6、.125mg/L,MIC90為0.5mg/L。在E-test法檢測的95株Hp菌株中,利福平的耐藥率為1.1％,MIC范圍0.008～8mg/L,MIC50為0.016mg/L,MIC90為0.25mg/L；四環(huán)素的耐藥率為0％,MIC范圍0.016～1mg/L,MIC50為0.094mg/L,MIC90為0.5mg/L。兩種方法檢測得到的幽門螺桿菌對利福平和四環(huán)素的耐藥率相同。兩種方法測得兩種藥物對Hp的MIC值分別進行相關(guān)分析,得相

7、關(guān)系數(shù)r值分別為0.90、0.91。兩種方法檢測得到的MIC值不超過±1稀釋度的百分比均為95.8％。
　　 (2)在E-test法檢測的95株幽門螺桿菌菌株中,克拉霉素的耐藥率為27.4％,MIC范圍0.016～256mg/L,MIC50為0.25mg/L,MIC90為32mg/L；左氧氟沙星的耐藥率為25.3％,MIC范圍0.008～32mg/L,MIC50為0.25mg/L,MIC90為16mg/L；阿莫西林的耐藥率為6.

8、3％,MIC范圍0.016～32mg/L,MIC50為0.032mg/L,MIC90為0.75mg/L。
　　 (3)在95位患者的幽門螺桿菌菌株中:
　　 45例為男性,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林耐藥的菌株數(shù)分別為:11、11、2,耐藥率分別為24.4％、24.4％和4.4％。50例為女性,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林耐藥的菌株數(shù)分別為:15、13、4,耐藥率分別為30.0％、26.0％和8.0％。兩兩比較,

9、P值均大于0.05(差異無統(tǒng)計學意義)。
　　 52例為慢性胃炎患者,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林耐藥的菌株數(shù)分別為:12、13、3,耐藥率分別為23.1％、25.0％和5.8％。41例為消化性潰瘍患者,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林耐藥的菌株數(shù)分別為:13、11、3,耐藥率分別為31.7％、26.8％和7.3％。兩兩比較,P值均大于0.05(差異無統(tǒng)計學意義)。
　　 60例來自城市,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫

10、西林耐藥的菌株數(shù)分別為:12、11、1,耐藥率分別為20.0％、18.3％和1.7％。35例來自農(nóng)村,對克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林耐藥的菌株數(shù)分別為:14、13、5,耐藥率分別為40.0％、37.1％和14.3％。兩兩比較,P值均小于0.05(差異有統(tǒng)計學意義)。
　　 結(jié)論:
　　 1、瓊脂稀釋法和E-test法體外檢測幽門螺桿菌對利福平、四環(huán)素的耐藥結(jié)果相當。E-test法操作簡單,更適合在臨床推廣運用。

11、　　 2、海南地區(qū)幽門螺桿菌體外對克拉霉素、左氧氟沙星的耐藥率已經(jīng)達到27.4％、25.3％,對阿莫西林的耐藥率仍然比較低,對利福平敏感,未見對四環(huán)素耐藥的菌株。克拉霉素和左氧氟沙星不適合用于一線抗幽門螺桿菌治療,建議行藥物敏感試驗或使用阿莫西林、四環(huán)素治療。鑒于利福平為抗結(jié)核菌的重要藥物,為保持利福平對結(jié)核菌的高度敏感性,有必要限制它的使用,并且長期監(jiān)測導致利福平耐藥的危險因素。建議用于補救方案的治療。
　　 3、幽門螺桿菌