IGF-1對早孕細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系.pdf

1、本文研究目的：通過檢測子癇前期孕婦血清中胰島素樣生長因子-1(IGF-1)及IGFBP-3水平的變化，以及IGF-1、IGF-1R和IGFBP-3在子癇前期和正常妊娠絨毛或胎盤中的表達(dá)差異，以期探討IGF-1在正常妊娠和病理妊娠中的作用，并通過體外研究加以驗(yàn)證，為深入探討IGF-1與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。 研究方法： 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測正常和子癇前期孕婦血清中IGF-1和IGFBP-3水平的變

2、化；以人不同孕周的絨毛或胎盤為材料，采用免疫組化和逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)研究了IGF-1及其受體IGF-1R、結(jié)合蛋白IGFBP-3在不同妊娠時期胎盤中的時空表達(dá)；同時以妊娠中晚期胎盤為材料，以同孕周正常胎盤作對照，檢測IGF-1及其受體IGF-1R、結(jié)合蛋白IGFBP-3在子癇前期胎盤中的表達(dá)；在體外研究中采用無血清原代細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞儀、蛋白印跡和明膠酶譜分析等方法觀察IGF-1對人早孕細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡、分化(向類

3、血管內(nèi)皮細(xì)胞)和侵潤等生物學(xué)行為的影響。 研究結(jié)果： 研究表明子癇前期孕婦血清中IGF-1和IGFBP-3水平較正常孕婦明顯降低，且下降程度與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)；而正常孕婦和子癇前期患者血清IGF-1和IGFBP-3水平呈明顯正相關(guān)關(guān)系。 在妊娠早期絨毛、中期和足月胎盤中IGF-1、IGF-1R及其IGFBP-3均有表達(dá)。表達(dá)部位主要集中在絨毛小葉的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞。IGF-1及IGF-1R隨著孕周的

4、進(jìn)展在轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)水平表達(dá)均有增高趨勢，在妊娠32周達(dá)到較高水平，維持至妊娠足月表達(dá)稍有降低，IGFBP-3的表達(dá)則呈現(xiàn)下降趨勢。 在妊娠28周到足月正常妊娠與子癇前期胎盤組織中IGF-1及IGFBP-3mRNA表達(dá)存在顯著不同，IGF-1及：IGFBP-3在子癇前期胎盤組織中的表達(dá)較正常妊娠胎盤表達(dá)明顯降低，但其受體的表達(dá)同正常妊娠胎盤相比無顯著變化。其中28周和32周子癇前期胎盤中IGF-1及IGFBP-3的表達(dá)低于38周子

5、癇前期胎盤。 體外研究表明，10ng/mlTNFα能誘導(dǎo)原代無血清培養(yǎng)的正常人早孕細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡。應(yīng)用生理劑量10nMIGF-1能顯著抑制TNF α誘導(dǎo)的凋亡，流式細(xì)胞術(shù)檢測其凋亡率顯著降低，細(xì)胞凋亡信號傳導(dǎo)分子Caspase-3和凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)降低，凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和激酶P13/Akt表達(dá)升高；同時生理劑量IGF-1作用于原代無血清培養(yǎng)的正常人早孕細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)明顯升高，這

6、種作用呈時間依賴性，而基質(zhì)金屬蛋白酶2、9(MMP2、9)分泌雖隨作用時間延長有增加趨勢，但未見顯著性差異。 研究結(jié)論： 孕期滋養(yǎng)層細(xì)胞是IGF-1的重要來源之一。揭示了IGF-1、IGF-1R及其IGFBP-3在整個妊娠期絨毛或胎盤中表達(dá)的時空特點(diǎn)，以及IGF-1和IGFBP-3在子癇前期血清和胎盤中的異常低表達(dá)。體外研究證實(shí)IGF-1能部分抑制TNFa誘導(dǎo)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，P13K/Akt依賴性途徑可能是IGF-1