IL-17誘導(dǎo)炎性因子及iNOS表達(dá)參與宿主抗衣原體免疫保護(hù).pdf

1、目的：
　　 針對(duì)IL-17對(duì)某些細(xì)胞因子/趨化性細(xì)胞因子及一氧化氮合成酶（induciblenitric oxide synthase，iNOS）表達(dá)的調(diào)節(jié)，探討IL-17在小鼠沙眼衣原體肺炎菌株（Chlamydia muridarum，Cm）呼吸道感染中的作用及機(jī)制。
　　 方法：
　　 BALB/c小鼠鼻腔吸入1×103 IFU Cm，建立小鼠Cm呼吸道感染模型。于感染后不同天數(shù)處死小鼠。利用RT-PCR及

2、ELISA技術(shù)檢測(cè)小鼠肺組織IL-17 mRNA及蛋白的表達(dá)，并利用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色技術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟IL-17+CD4+T細(xì)胞即Th17細(xì)胞百分率，確定IL-17及Th17在小鼠衣原體肺感染中的產(chǎn)生及誘導(dǎo)。利用抗鼠IL-17單克隆抗體鼻腔吸入中和Cm感染小鼠內(nèi)源性IL-17，以抗鼠IL-17單克隆抗體獨(dú)特型（IgG2a）作為對(duì)照。通過(guò)檢測(cè)小鼠體重變化、肺組織衣原體生長(zhǎng)及病理學(xué)改變，確定IL-17在衣原體肺感染中的保護(hù)作用。對(duì)支氣管肺泡

3、灌洗液內(nèi)炎癥細(xì)胞進(jìn)行染色及分類(lèi)計(jì)數(shù)，確定IL-17對(duì)肺組織浸潤(rùn)的炎細(xì)胞類(lèi)型的影響。最后，利用RT-PCR檢測(cè)IL-17對(duì)肺組織及小鼠肺上皮細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子/趨化性細(xì)胞因子及iNOS表達(dá)的影響，探討IL-17在小鼠衣原體肺感染中的保護(hù)作用機(jī)制。
　　 結(jié)果：
　　 Cm呼吸道感染可誘導(dǎo)小鼠肺組織IL-17產(chǎn)生及脾臟Th17細(xì)胞擴(kuò)增。與給予獨(dú)特型抗體IgG2a的對(duì)照組比較，IL-17中和小鼠顯示嚴(yán)重的疾病狀態(tài)，主要包括：明顯的

4、體重降低、肺組織衣原體持續(xù)大量生長(zhǎng)及更為嚴(yán)重的肺組織病理學(xué)改變。IL-17中和小鼠支氣管肺泡灌洗液中性粒細(xì)胞（PMN）百分率及絕對(duì)數(shù)量顯著下降，而淋巴及單核細(xì)胞百分率及絕對(duì)數(shù)量升高。IL-17中和小鼠肺組織與PMN趨化作用相關(guān)的因子，MIP-2及IL-6 mRNA表達(dá)顯著下降，而T細(xì)胞趨化因子RANTES表達(dá)上調(diào)；體外實(shí)驗(yàn)顯示，IL-17可協(xié)同TNF-a顯著上調(diào)小鼠肺上皮細(xì)胞（TC-1）MIP-2及IL-6表達(dá)，但下調(diào)TNF-a誘導(dǎo)的R

5、ANTES表達(dá)。此外，IL-17可顯著上調(diào)小鼠肺組織及TC-1細(xì)胞iNOS表達(dá)，并增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)NO產(chǎn)生，參與細(xì)胞內(nèi)抗衣原體反應(yīng)。
　　 結(jié)論：
　　 衣原體呼吸道感染可誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)IL-17產(chǎn)生及Th17細(xì)胞擴(kuò)增。IL-17在衣原體呼吸道感染中發(fā)揮重要保護(hù)作用。其作用機(jī)制包括：IL-17調(diào)節(jié)細(xì)胞因子/趨化性細(xì)胞因子在小鼠肺組織，尤其是肺上皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，誘導(dǎo)不同類(lèi)型炎細(xì)胞在肺組織浸潤(rùn)，參與炎性應(yīng)答的調(diào)節(jié)；其次，IL-17通