葡萄籽原花青素對大鼠硒性白內(nèi)障的抑制作用及其機(jī)理研究.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 不同劑量葡萄籽原花青素對大鼠硒性白內(nèi)障的抑制作用
　　目的:探討不同劑量葡萄籽原花青素對大鼠硒性白內(nèi)障的抑制作用
　　方法:將80只8日齡的SD大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組和GSPE低、中、高劑量組。對照組給予生理鹽水皮下注射,模型組于第10日齡起給予亞硒酸鈉20μmol/kg頸背部皮下注射,隔日1次,連續(xù)3次。GSPE各組除給予同樣造模外,從第8日齡起還分別給予低劑量組5

2、0mg/kg、中劑量組100mg/kg、高劑量組200mg/kg的GSPE灌胃,每天1次連續(xù)14天。待乳鼠睜眼后用裂隙燈顯微鏡觀察晶狀體的渾濁程度,分級以及拍照,并每天測量晶狀體核性渾濁斑塊的最大直徑變化。光鏡下 HE染色觀察各組晶狀體組織的細(xì)胞形態(tài)。
　　結(jié)果:模型組全部形成典型的核性白內(nèi)障,造模成功率100％。與模型組相比, GSPE各組的晶狀體渾濁程度和核性渾濁斑塊的最大直徑明顯減小(P<0.05或P<0.01或P<0.00

3、1)。光鏡下HE染色發(fā)現(xiàn)GSPE干預(yù)后,晶狀體組織的損傷程度減輕,且與GSPE有劑量關(guān)系。
　　結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)證實(shí)了GSPE能明顯抑制亞硒酸鈉引起的核性白內(nèi)障的形成和發(fā)展,且有時間–劑量關(guān)系,其最低有效劑量為50mg/kg。
　　第二部分 葡萄籽原花青素抑制大鼠硒性白內(nèi)障的機(jī)理研究
　　目的:探討葡萄籽原花青素提取物抑制大鼠硒性白內(nèi)障的機(jī)理研究。
　　方法:將80只8日齡的SD大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組、GSPE低

4、、中、高劑量組。對照組給予生理鹽水皮下注射,模型組于第10日齡起給予亞硒酸鈉20μmol/kg頸背部皮下注射,隔日1次,連續(xù)3次。GSPE各組除給予同樣造模外,從第8日齡起還分別給予低劑量組50mg/kg、中劑量組100mg/kg、高劑量組200mg/kg的GSPE灌胃,每天1次連續(xù)14天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測量各組晶狀體中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)、鈣

5、離子(Ca2+)含量及晶狀體組織抑制羥自由基(OH-)的能力。用免疫組織化學(xué)法觀察iNOS、calpainⅡ蛋白在各組晶狀體上皮細(xì)胞中(LECs)的表達(dá)情況,并用平均吸光度(AOD)反應(yīng)各組的表達(dá)量。用實(shí)時熒光定量 RT-PCR法檢測 iNOS、calpainⅡmRNA在各組晶狀體中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:與對照組比,模型組晶狀體中抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-PX)的活性及抑制羥自由基的能力顯著下降,同時 MDA、Ca2+、

6、NO的含量和iNOS、calpainⅡ蛋白吸光度及mRNA的表達(dá)水平顯著上升(P<0.01或 P<0.001);與模型組相比,GSPE各組抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-PX)的活性及抑制羥自由基的能力明顯升高,同時 MDA、Ca2+、NO的含量和iNOS、calpainⅡ蛋白及mRNA的表達(dá)水平明顯下降(P<0.05或 P<0.01或 P<0.001),且與 GSPE有劑量依賴性。
　　結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)證實(shí)了GSPE能顯著抑制亞硒