葡萄籽原花青素對(duì)人卵巢癌耐藥細(xì)胞COC1-DDP增殖抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察葡萄籽來源的原花青素(GSPE)對(duì)人卵巢癌耐藥細(xì)胞COC1/DDP的增殖抑制作用,并初步探討其機(jī)制。
　　 方法：(1)在第一部分實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)觀察,HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化,MTT法檢測(cè)不同濃度葡萄籽來源的原花青素(0、20、40、80、160、320μg/ml)不同時(shí)間(24、48、72h)對(duì)COC1/DDP的增殖抑制作用,測(cè)定抑制率。(2)在第二部分實(shí)驗(yàn)中,流式細(xì)胞儀和 TUNEL檢測(cè)各濃度GSPE作用

2、后細(xì)胞凋亡情況,Western-blot和RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Caspase-3,bcl-2,bax基因的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：經(jīng)GSPE作用后,COC1/DDP細(xì)胞體積變小,邊緣皺縮,胞漿內(nèi)顆粒物質(zhì)增多；HE染色觀察發(fā)現(xiàn)GSPE能引起明顯的細(xì)胞凋亡形態(tài)改變,在相同作用時(shí)間下,藥物濃度越高,形態(tài)改變?cè)矫黠@；經(jīng)MTT試驗(yàn)和細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率測(cè)定,GSPE對(duì)COC1/DDP有明顯的增殖抑制作用,而且這種抑制作用隨著其濃度的增大和作用

3、時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng),。流式細(xì)胞術(shù)和TUNEL表明GSPE可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,且隨著藥物濃度增加,凋亡率升高。Western blot和RT-PCR檢測(cè)顯示隨著藥物濃度增加,Caspase-3和bax蛋白表達(dá)增加,bcl-2的表達(dá)下降。
　　 結(jié)論：葡萄籽原花青素在體外對(duì)人卵巢癌耐藥細(xì)胞COC1/DDP有明顯的增殖抑制作用,并能誘導(dǎo)其調(diào)亡,增加Caspase-3和bax蛋白表達(dá),降低bcl-2的表達(dá)。GSPE誘導(dǎo)人卵巢癌耐藥細(xì)胞COC