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文檔簡介
1、目的:研究人參皂苷Rb1通過激活Nrf2/ARE通路從而達到減輕術后疲勞綜合征(POFS)老年大鼠骨骼肌氧化應激損傷,并進一步深入探討人參皂苷Rb1所具有的抗疲勞機制。
方法:采用制作70%中段小腸切除外加端端吻合術法來作為術后疲勞綜合征大鼠模型,首先通過體重測試篩選出96只重量相近的SPF級老年雄性Sprague-Dawley大鼠,再隨機分為對照組,模型組和人參皂苷Rb1干預組(GRb1組)三組。每組再按不同時間點分為術后第
2、6小時、術后第1天、術后第3天、術后第7天4小組,共12小組,每小組8只。GRb1組分別于手術前1小時及術后每天腹腔注射15mg·kg-1體重的人參皂苷Rb1。作為對照,對照組和模型組則在相同條件下腹腔注射同體積的生理鹽水。然后每組分別在術后第6小時、第1、3、7天進行曠場實驗并檢測其行為學變化,之后分光光度法測定其骨骼肌內(nèi)丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用RT-PCR法測定大鼠骨骼肌內(nèi)Nrf2 mRNA以及其下游Ⅱ
3、相解毒酶基因Nqo1 mRNA表達;用Western blotting法測定大鼠骨骼肌核內(nèi)Nrf2蛋白轉(zhuǎn)位水平及Nrf2總蛋白的表達情況。
結果:曠場實驗結果顯示,相比于對照組,模型組大鼠在術后一定時間點內(nèi)穿越格子數(shù)明顯減少(d1,d3,P<0.05),休息時間明顯延長(d1,d3,d7,P<0.05);相比于模型組,人參皂苷Rb1干預組大鼠穿越格子數(shù)在術后一定時間點內(nèi)明顯增加(d1,d3,P<0.05)。相比于與對照組,模型
4、組大鼠骨骼肌SOD活性在術后一定時間點內(nèi)明顯增加(d3,d7,P<0.05),MDA含量明顯升高(d1,d3,d7,P<0.05);相比于與模型組,人參皂苷Rb1干預組大鼠骨骼肌SOD活性在術后一定時間點內(nèi)明顯增加(d3,d7,P<0.05),MDA含量明顯降低(d3,d7,P<0.05)。而RT-PCR檢測結果顯示,相比于與對照組,模型組骨骼肌Nrf2 mRNA表達在術后一定時間點內(nèi)明顯升高(d1,d3,P<0.05),Nqo1 mR
5、NA表達雖有上升趨勢,但并無統(tǒng)計學差異(d1,d3,P>0.05);而相比于與模型組,人參皂苷Rb1干預組Nrf2 mRNA表達在術后一定時間點內(nèi)明顯升高(6h,d1,d3,P<0.05),Nqo1 mRNA表達亦明顯升高(6h,d1,P<0.05)。Western blotting檢測結果顯示,相比于與對照組,模型組大鼠骨骼肌核內(nèi)Nrf2蛋白表達在術后一定時間點內(nèi)明顯升高(6h,d1,d3,d7,P<0.05),總Nrf2蛋白表達略有
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